SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1868—2007 进出口油菜籽及其饼粕中 硫代葡萄糖苷总量的测定方法 Determination of total glucosinolates in rapeseed and its meal for import and export 行业标准信息服务平台 2007-04-06发布 2007-10-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T18682007 前言 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：倪昕路、褚庆华。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T1868—2007 进出口油菜籽及其饼粕中硫代葡萄糖总量的测定方法 1范围 本标准规定了进出口油菜籽及其饼粕中硫代葡萄糖苷总量的测定方法。 本标准适用于油菜籽及其饼中硫代葡萄糖苷总量的测定。 2测定方法 2.1方法提要 样品加热使自然态酶灭活，经沸水提取后，用弱阴离子交换树脂柱层析净化，添加黑芥子硫苷酸酶 水解硫代葡萄糖苷得到葡萄糖并用水洗脱。加入葡萄糖显色试剂，使样品溶液呈色，在505nm波长测 定吸光度。根据葡萄糖标准曲线校正，计算样品中硫代葡萄糖苷总量。 2.2试剂和材料 除另有规定外，试剂为分析纯，水为蒸馏水。 2.2.1无水磷酸氢二钠。 2.2.2氯化钠。 2.2.3钨酸钠。 2.2.4苯酚。 2.2.5浓盐酸。 2. 2. 6 弱阴离子交换树脂，DEAESephadexA-25。 2.2.7 氢氧化钠。 2.2. 8 冰乙酸。 2.2.9无水乙酸钠。 2.2.10 三羟甲基氨基甲烷。 2.2.11 黑芥子硫苷酸酶（EC3.2.1.147)，活力单位200U/g 2.2. 12 4-氨基安替吡啉。 2.2. 13 葡萄糖氧化酶（EC1.1.3.4)活力单位20000U/66.67mg。 2.2. 14 过氧化物酶（EC1.11.1.7)，活力单位10000U/52.6mg。 2. 2. 15 盐酸溶液（2mol/L）：量取17.2mL浓盐酸倒人100mL水中。 2. 2. 16 苯酚-钨酸溶液：称取5.0g钨酸钠、5.0g无水磷酸氢二钠和9.0g氯化钠于500mL容量瓶 中，用约350mL水溶解，用2mol/L盐酸溶液调节pH至3.0,加人2.0g苯酚，用水定容至500mL。 2.2. 17全 氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：称取20g氢氧化钠溶解于约800mL水中，以水定容至1L。 2.2.18乙酸钠缓冲液（0.2mol/L）：称取16.5g无水乙酸钠和11.5mL冰乙酸溶解于约950mL水 中，用2mol/L盐酸溶液调节pH至4.9,用水定容至1L。 2.2.19Tris-HCI缓冲液：称取1.6g三羟甲基氨基甲烷溶解于约900mL水中，用2mol/L盐酸溶液 调节pH至7.0，用水定容至1L。 2.2.20黑芥子硫苷酸酶溶液：称取500mg黑芥子硫苷酸酶于10mL容量瓶中，加水溶解并定容，实 验当日制备。 2.2.21 葡萄糖显色溶液：称取10g无水磷酸氢二钠于盛有约750mL水的1L容量瓶中，加人 131.7mg葡萄糖氧化酶于容量瓶中并摇匀；称取16.7mg过氧化物酶和333mg4-氨基安替吡啉于盛 1