SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1812—2006 禾草腥黑粉菌、剪股颖腥黑粉菌、黑麦草 腥黑粉菌检疫鉴定方法 Identification of Tilletia fusca Ellis & Everhart,Tilletia sphaerococca (Wallroth) Fischer v Waldheim and Tilletialolii Auerswald ex Winter 行业标准信息服务平台 2007-03-01实施 2006-08-28发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1812—2006 前言 本标准的附录A、附录B及附录C均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：罗加凤、黄国明、崔铁军、刘跃庭、廖芳。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T1812—2006 禾草腥黑粉菌、剪股颖腥黑粉菌、黑麦草 腥黑粉菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了进境植物检疫中禾草腥黑粉菌（Tilletiafusca）、剪股颖腥黑粉菌（Tilletiasphaero cocca）、黑麦草腥黑粉菌（Tilletialolii）的检疫鉴定方法。 本标准适用于雀麦属、羊茅属、早熟禾属及其他禾草腥黑粉菌寄主草种中禾草腥黑粉菌；剪股颖属 草种中剪股颖腥黑粉菌和黑麦草属草种中黑麦草腥黑粉菌的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T18085—2000小麦矮化腥黑粉菌检疫鉴定方法 3原理 禾草腥黑粉菌TilletiafuscaEllis&Everharl、剪股颖腥黑粉菌Tilletiasphaerococca（Wallroth） FischervWaldheim、黑麦草黑粉菌TilletialoliiAuerswaldexWinter同属担子菌亚门Basidiomy cotina，冬孢菌纲Teliomycetes，黑粉菌目Ustilaginales，腥黑粉菌科Tilletiaceae，黑粉菌属Tilletia。 被侵染的植株结实时，种子被病菌冬孢子侵占，形成菌瘦。病菌随种子远距离传播。病原菌冬孢子形态 学特征及萌发生理学特性，是鉴定此三种腥黑粉菌的主要依据。主要分布区参见附录A、附录B和 附录 C. 4仪器设备 多功能显微镜、体视显微镜、低速离心机、往复式振荡器、涡旋振荡器、干热灭菌器、高压灭菌器、普 通天平（感量1/100g）生物安全柜或超净台、生物培养箱（具光照，低温可调至5℃）、可调微量加样器 （5μL~200μL）、三角瓶（250mL）离心管、载玻片（长×宽为25.4mm×76.2mm，厚0.8mm）、盖玻 片（18mm×18mm）、Parafilm膜或铝铂纸、白瓷盘、Eppendorf管（1.5mL）、培养皿。 5药品试剂 次氯酸钠溶液或漂白粉精片（化学纯）、吐温20（Tween-20）、席尔氏浮载剂（见GB/T18085—2000 附录A席尔氏浮载剂配制方法）、琼脂粉、无荧光显微镜物镜镜头浸泡油（N。=1.516）、封片剂。 6实验室检验 6.1样品制备 样品接收后在样品预备室内将原始样品在样品袋内充分混匀，制成平均样品。从平均样品中称取 50g作为试验样品。 6.2洗涤检验 6.2.1洗涤离心 试验样品倒入灭菌三角瓶内，加蒸馏水100mL，再加吐温一201滴～2滴，用铝铂纸或Parafilm膜 1