SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1692.1—2006 非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程 Protocol of agar-gel immunodiffusion test for African horse sickness 行业标准信息服务平台 2006-01-26发布 2006-08-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1692.1—2006 前 言 本部分参照世界动物卫生组织（OIE）的《陆生动物疾病诊断和疫苗手册》制定。 SN/T1692分为三部分： 非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程； 一非洲马瘟血球凝集和血球凝集抑制试验操作规程； 非洲马瘟补体结合试验操作规程。 本部分为SN/T1692的第1部分。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国云南出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：杨晶焰、徐自忠、陈建军、龙忠保。 本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1692.1—2006 非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程 1范围 SN/T1692的本部分规定了非洲马瘟琼脂免疫扩散试验的操作规程。 本部分适用于非洲马瘟琼扩抗体的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过SN/T1692的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3试剂和材料 3.1抗原：非洲马瘟组织培养抗原。 3.2非洲马瘟阳性血清。 3.3平皿。 3.4微量移液器。 3.5微量滴头。 3.6三角烧瓶。 3.7琼脂糖。 3.8氯化钠：分析纯。 3.9 叠氮钠：分析纯。 3.10 水：符合GB/T6682分析实验室二级水规格。 4操作步骤 4.1琼脂凝胶平板的制备 称取琼脂糖1.2g，氯化钠1.0g，加人100mL水，经68.94kPa、10min高压或煮沸溶解后，冷却至 45℃，加入0.01g叠氮钠。每个平血加融化琼脂，使琼脂板厚度为2.5mm~2.8mm，待凝固后倒置， 放4℃冰箱15min。 4.2打孔 中间1孔，周围6孔为一组。孔径4mm，孔间距24mm。用针挑出或吸出孔内琼脂。 4.3加样 中心孔加抗原，1、3、5孔加标准阳性血清；2、4、6孔加被检血清。加样量以孔平为准，加样后置湿盒 内于室温（22℃～25℃）反应，每次试验设阳性对照。 5判定 5.124h初判，72h终判。当阳性对照成立时，进行判定。 阳性：被检血清孔与抗原孔之间出现致密的沉淀线，并与标准阳性血清的沉淀线末端呈平滑相 连者。 1