SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1586.1—2005 菜豆细菌性萎蕉病菌检测方法 DetectionforCurtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens(Hedges)Collins and Joues 行业标准信息服务平台 2005-05-20发布 2005-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1586.1—2005 前 本标准的附录A、附录B、附录C为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：种焱、洪炜、宁跃明、赵纪文、赵汗青。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1586.1—2005 菜豆细菌性萎蕉病菌检测方法 1范围 本标准规定了进境植物检疫中菜豆细菌性萎病菌检测方法 本标准适用于来自菜豆细菌性萎病发生国家和地区的菜豆、绿豆、豇豆、大豆和丁癸草等植物种 子的进境检疫。 2仪器和试剂 2.1仪器设备 生物显微镜、荧光显微镜、超净工作台、生物培养箱、天平、高速冷冻离心机、高压灭菌器、烧杯、三角 瓶、量筒、试管、培养皿、载玻片、盖玻片、酒精灯等。 2.2实验用具 手术刀、手术剪刀、镊子等。 2.3培养基配方 2.3.1营养葡萄糖琼脂培养基（NDA） 营养琼脂十1%（质量浓度）葡萄糖。 2.3.2金氏B培养基 20g蛋白陈，10g甘油，1.5g磷酸氢二钾（KzHPO），1.5g硫酸镁（MgSO4.7H2O），15g琼脂， 1000mL蒸馏水。pH-7.2。 2.4浸泡液配方（Lelliott和Setar） 20g抗泡沫剂复合物，2g焦磷酸钠盐，1gLubrolWFlakes表面活性剂，1000mL蒸馏水。 3现场检疫和抽样 对一批来自菜豆细菌性菱病发生国家和地区（参见附录A、附录B)的菜豆、绿豆、豇豆、大豆和丁 癸草等植物种子按进境总量的0.5%~5%的比例随机扦取样品。 现场检疫和抽样时应重点观察种子表皮的颜色，尤其是种皮下和种脐部位是否带有黄色的细菌粘 准信息服务 胶层或细菌粘液。 4方法和步骤 4.1外观症状 4.1.1种子的颜色 菜豆细菌性萎為病菌存在于大豆和菜豆的种子内外部。系统侵染的种子在种皮下有一层厚的细菌 层，皇亮黄色，表面侵染的种子仅在种脐有一点黄色细菌粘液。若是受其他变种侵染，则皇桔黄色或紫 色。一旦发现异常种子需进行隔离种植或间接分离病菌。 4.1.2植株症状观察 待种植于隔离温室或指定隔离场地的种子长出幼苗后，对其表现进行系统的观察，主要观察出苗情 况、植株和叶片有无异常表现及豆英上有无异常等。一旦发现异常植株需直接进行分离病菌 1