SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1575—2005 鸡包涵体肝炎酶联免疫吸附 试验操作规程 Protocol of enzyme -linked immunosorbent assay for chickeninclusivebodyhepatitis 行业标准信息服务平台 2005-05-20发布 2005-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1575—2005 前言 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国内蒙古出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：刘中学、赵林立、刘虹。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1575—2005 鸡包涵体肝炎酶联免疫吸附 试验操作规程 1范围 本标准规定了鸡包涵体肝炎酶联免疫吸附试验方法。 本标准适用于鸡包涵体肝炎病毒抗体的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（neqISO3696：1987) 3仪器和试剂 3.1仪器 3.1.1酶标仪：具490nm波长滤光片。 3.1.296孔酶标板。 3.1.3微量加样器：50μL、100μL。 3.1.4微量振荡器。 3.1.5恒温箱：37℃。 3.1.6湿盒或封口膜。 3.1.7注射器：2mL，配6号针头。 3.1.8微量离心管：1.5mL。 3.1.9台式微量离心机。 3.2试剂 本标准所用化学试剂除另有特殊规定外，均为分析纯。实验用水需符合GB/T6682中二级水 要求。 3.2.1包被液：碳酸盐缓冲液，0.1mol/L，pH9.6。配制方法见第A.1章。 3.2.2洗涤液：含有0.05%（体积分数）Tween-20的磷酸盐缓冲液（PBS-T），0.01mol/L，pH7.4。配 制方法见第A.2章。 3.2.3稀释液：含有2.5%（质量浓度）牛血清日蛋白的PBST。使用当日配制。 3.2.4底物溶液：含有0.04%（质量浓度）邻苯二胺及0.1%（体积分数）双氧水的柠檬酸-磷酸盐缓冲 服务平台 液，pH5.0。配制方法见第A.3章，现用现配。 3.2.5终止液：2mol/L硫酸溶液。 3.2.6标准抗原：鸡包涵体肝炎病毒ELISA抗原。 3.2.7标准血清：阳性血清、阴性血清。 3.2.8酶标羊抗鸡或兔抗鸡抗体。 4采血 用75%酒精棉球对被检鸡一侧翅膀的翅静脉所在部位（臂二头肌和脑三头肌之间的深窝处）进行 T