SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1419—2004 疗疮病细菌学诊断操作规程 Protocol of bacterial diagnosis for furunculosis 行业标准信息服务平台 2004-06-01发布 2004-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1419—2004 前言 本标准的附录A和附录B是规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检疫局。 本标准主要起草人：薄清如、黄建珍、黄云君、王小玉、冯家望、 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1419—2004 疗疮病细菌学诊断操作规程 1范围 本标准规定了疗疮病感染病原-灭鲢气单胞菌的分离鉴定方法。 本标准适用于科鱼病疮病的检验、疫情监测和流行病学调查。 2仪器、试剂 2.1仪器 显微镜（具油镜、暗视野）、恒温培养箱、接种环、培养血等 2.2培养基和试剂 氏染色液I、Ⅱ、Ⅲ、N、V-P试剂（培养基和试剂的配制见附录A）。 3分离鉴定步骤 分离鉴定流程见附录B。 4临床诊断 4.1临床分型 急性型病鱼很快死亡，无任何外部症状。亚急性型病情发展较慢，在躯干肌肉上形成典型的疮变 化后，陆续死亡。慢性型病鱼长期处于带菌状态，无症状，也不死亡。 4.2临床症状和病理变化 发病鱼表现为离群独游，活动缓慢，体色发黑。在鱼体驱干部，通常在背鳍基部两侧的肌肉组织上 出现数个小范围的红肿脓疮向外隆起，柔软浮肿。隆起表面逐渐出血坏死、溃烂而形成溃疡口。溃疡范 围小，不成片。肠道充血发炎，肾脏软化、肿大呈淡红色或暗红色。肝脏退色，脂肪变性。 5采样 健康监测的采样：每个渔场应每六个月检查一次，原则上采集总鱼数的0.2%，最少不应小于150 条鱼，从肾、脾、肝等脏器无菌采集样本。如果渔场经实验室检测两年，未发现病原，也无任何可疑临床 症状之后，则认为是无灭鲢气单胞菌的渔场。这样的渔场每年还应检测两次，不过每次采集的样本数可 减少到30条鱼。 临床诊断采样：如果有皮肤病变，则从皮肤病变处取样，同时从肾、脾、肝等脏器中采样。 方法：先用解剖针刺穿头骨，破坏小脑，使鱼失去运动能力。对于皮肤病变部位，用灭菌解剖刀切开 疮的患部（或溃疡部），无菌采集病变组织。接种TSA培养基，同时作一张涂片用于革兰氏染色，另取 少许样品作细菌的运动性检查；对于内脏的采样，则用点燃的酒精棉球擦净、消毒被检鱼体表，在肛门前 面0.5cm处用无菌剪刀剪开腹部，然后从此处沿一侧向背部逐步转向头部剪成弧形切口，打开腹腔，无 菌采集脏器。 1