SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2010—2007 植原体脱除方法 Method for elimination of phytoplasma 行业标准信息服务平台 2007-12-24发布 2008-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T20102007 前 言 本标准的附录A、附录B、附录C、附录D均为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国上海出人境检验检疫局负责起草，中国检验检疫科学研究院参加起草。 本标准主要起草人：杨翠云、于翠、魏梅生、赵文军、乔艳艳、陶庭典。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T2010—2007 植原体脱除方法 1范围 本标准规定了植物种苗、鳞球茎和组培苗的植原体脱除及检测的基本原则和方法。 本标准适用于进出境植物种苗、鳞球茎和组培苗的植原体脱除和检测。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2. 1 植原体phytoplasma 寄生于植物韧皮部和介体昆虫体内的、具有三层单位膜结构的无细胞壁的原核生物。一般引起植 物叶片的黄化和发育畸形等症状，对四环素族类抗生素敏感，而对青霉素不敏感 2. 2 外植体explant 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞和原生质体等 2.3 脱植原体苗phytoplasma-freemicroplant 应用茎尖组织培养等技术获得再生的试管苗，经检测确认不带该种植物的有害植原体，可认定为脱 植原体苗。 3原理 植原体形态一般有球形、圆形、长杆形、梭形、带状形和多态不规则形，大小为50nm～1000nm，其 结构较病毒复杂，具有细胞结构，但没有细胞壁，被单位膜包裹，单位膜由两层蛋白质膜和中间一层脂膜 组成，厚度约为10nm 在植物体内植原体主要分布在韧皮部，根尖和芽尖的分生组织内植原体含量少或不含植原体。在 高温下可钝化植原体，明显减弱或抑制植原体在植物体内的繁殖。植原体对四环素族类抗生素敏感，而 对青霉素不敏感。 4仪器设备、用具及试剂 4.1仪器设备 4.2用具 镊子、剪刀、酒精灯等。 4.3主要试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯。乙醇、漂白粉、升汞、MS培养基试剂（见附录A） 5植原体脱除方法 5.1茎尖培养脱除植原体 5.1.1培养材料的灭菌处理 将组织培养材料用流水冲洗干净，在凹凸不平处以及鳞片缝隙处用软刷等将污物彻底清除干净，最 1