SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1195—2003 大豆中转基因成分的定性PCR 检测方法 Protocol of thequalitativepolymerase chainreaction(PCR) for detecting genetically modified component in soybeans 行业标准信息服务平台 2003-09-01实施 2003-03-17发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1195—2003 前 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：蒋原、祝长青、林宏。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1195—2003 大豆中转基因成分的定性PCR 检测方法 1范围 本标准规定了大豆中转基因成分的定性聚合酶链式反应（PCR)检测方法。 本标准适用于大豆中抗草甘麟转基因大豆（roundupreadysoybean）中的转基因成分的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T1193基因检验实验室技术要求 SN/T1194植物及其产品转基因成分检测的抽样和制样方法 SN/T1204植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法 3术语、定义和缩略语 下列术语、定义和缩略语适用于本标准。 3. 1 转基因成分 genetically modified component 将物种本身不具有的、而是来源于其他物种的功能基因序列。 3. 2 聚合酶链式反应ploymerasechainreaction（PCR） 模板基因序列先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设 计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在DNA聚合 酶的作用下以四种脱氧核糖核酸（dNTP）为底物，使引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这 一循环，使欲扩增的基因片段以儿何倍数扩增。 3.3缩略语 3.3.1Lectin：植物凝集素基因，为大豆本身含有的内源基因。 3.3.2CaMV35S:35Spromoterfromcauliflowermosaicvirus，花椰菜花叶病毒35S启动子。 3.3.3NOS:Terminatorof nopaline synthase gene from Agrobacterium tumefaciens,来源于农杆菌 的脂碱合成酶基因终正子。 3.3.4CP4EPSPS:5-enolpyruvylshikimate-3-phosphatesynthasegene,5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸 合成酶基因。 3.3.5RRS：roundupreadysoybean，美国Monsanto公司的获准商品化种植的抗除草剂草甘麟的转基 因大豆，转人外源基因有CaMV35S启动子，NOS终止子和CP4-EPSPS基因等。 1