SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1151.2—2011 代替SN/T1151.2—2002,SN/T1151.6—2004 对虾白斑病检疫技术规范 Quarantine protocol for white spot disease 行业标准信息服务平台 2011-05-31发布 2011-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1151.2—2011 前 言 SN/T1151系列标准共分为六部分： 虾桃拉综合征检疫技术规范 -对虾白斑病检疫技术规范 斑节对虾杆状病毒（MBV)诊断方法 ——虾黄头病检疫技术规范 -对虾杆状病毒(BP)检验方法 对虾白斑病毒斑点杂交和原位杂交检测操作规程 本部分为SN/T1151的第2部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分代替SN/T1151.2—2002《对虾白斑病毒（WSV）聚合酶链式反应（PCR）检测方法》和 SN/T1151.6—2004《对虾白斑病毒斑点杂交和原位杂交检测操作规程》。 本标准与SN/T1151.2—2002和SN/T1151.6—2004相比，主要技术变化如下： 增加了临床症状和综合判定方法。 本部分主要参考世界动物卫生组织（OIE)《水生动物疾病诊断手册》（2009版）中2.2.5章。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中国水产科学研究院黄海水产研究所、 中华人民共和国山东出入境检验检疫局。 本部分主要起草人：何俊强、刘、黄健、杨冰、雷质文、岳志芹、高隆英、江育林、史秀杰。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 1151.2—2002; —SN/T1151.6—2004。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 1151.2—2011 对虾白斑病检疫技术规范 1范围 SN/T1151的本部分规定了对虾白斑病的PCR、斑点杂交和原位杂交等检测方法。 本部分适用于对虾白斑病的流行病学调查、监测、诊断和检疫。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出人境动物检疫采样 3缩略语 下列缩略语适用于本文件 WSD(white spotdisease)：对虾白斑病 WSV(white spotvirus)：对虾白斑病毒 PCR(polymerasechainreaction）：聚合酶链式反应 NBT（nitrobluetetrazolium）：氮蓝四唑 BCIP(5-bromo-4chloro-3-indoyl)：5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸-甲苯胺盐 DMF（dimethylformamide）：二甲基甲酰胺 4概述 WSD是由WSV引起的一种对虾传染性疾病，是全世界养殖对虾中危害最为严重的对虾病毒病， 已被列入世界动物卫生组织（OIE）水生动物疫病名录，同时被我国列入一类动物疫病名录。病毒粒子 从杆状到椭圆状，带有三层囊膜，粒子较大（80nm～120nm×250nm～380nm）。基因组大小为290kb。 感染细胞肥大的核内能产生WSV特征性的包涵体。 务平 试剂材料及仪器设备 本标准所用试剂如无特殊说明均为分析纯试剂。试验用水符合GB/T6682一级水的要求。 5.1Taq酶：一20℃保存，避免反复冻融或温度剧烈变化。 5.2 dNTP:dCTP,dGTP、dATP.dTTP 各 10 mmoL/L。 5.3引物：两对引物浓度为40μmoL/L,其序列分别为： 146F1:5-ACT ACT AACTTCAGCCTA TCT AG-3 146R1:5'-TAA TGC GGG TGT AAT GTT CTT ACG A-3' 1