SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1135.9—2010 马铃薯青枯病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al. 1996 行业标准信息服务平台 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1135.9—2010 前言 SN/T1135标准分为以下部分： 马铃薯癌肿病检疫鉴定方法； 马铃薯黄化矮缩病毒检疫鉴定方法； 马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法； 马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法； 马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法； 马铃薯绯腐病菌检疫鉴定方法； 马铃薯A病毒检疫鉴定方法； 马铃薯坏疽病菌检疫鉴定方法； 马铃薯青枯病菌检疫鉴定方法。 本部分为SN/T1135的第9部分。 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局 和中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：易建平、周国梁、印丽萍、王有福、于恒纯。 行业标准信息服务平台 I SN/T1135.9—2010 马铃薯青枯病菌检疫鉴定方法 1范围 SN/T1135的本部分规定了进出境植物检疫中马铃薯青枯病菌Ralstoniasolanacearumrace3 biovar2的检测和鉴定方法。 本部分适用于进出境马铃薯块茎及其产品、番茄种苗及其产品和天竺葵种苗及其产品中马铃薯青 枯病菌的检测和鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T1157 进出境植物苗木检疫规程 SN/T 1193 基因检验实验室技术要求 SN/T 1809 进出境植物种子检疫规程 SN/T2122 进出境植物及植物产品检疫抽样 3原理 马铃薯青枯病菌R.solanacearumrace3biovar2属细菌域Bacteria，变形菌门Proteobacteria，β变 形菌纲Betaproteobacteria，伯克氏菌目Burkholderiales，伯克氏菌科Burkholderiaceae，劳尔氏菌属 Ralstonia。马铃薯青枯病菌的分布、寄主范围为害症状和生理生化特性等相关信息参见附录A。根 据青枯病菌对不同寄主植物的致病性差异，青枯菌划分为5个小种（参见附录B），马铃薯青枯病菌属于 3号小种，主要侵染马铃薯和番茄。根据青枯病菌对三种双糖（麦芽糖、乳糖和纤维二糖）和三种乙醇 菌属于生物型2（只能氧化3种双糖，不能氧化3种乙醇）。马铃薯青枯病菌的形态特征、生物学特性、 致病性反应以及分子生物学特征作为制定本检疫鉴定标准的依据。 4仪器设备和用具 超净工作台、高压灭菌锅、生物培养箱、电子天平、冰箱、离心机、水浴锅、培养血、三角瓶、剪刀PCR 5药品试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯或生化试剂。 蛋白陈、甘油、硫酸镁、磷酸氢二钾、琼脂、TaqDNA聚合酶、漠化乙锭（EB）、琼脂糖和DNA Marker。SMSA培养基配方见附录C，ELISA试验所需药品试剂见附录D,PCR试验和实时荧光PCR 试验所需药品试剂见附录E。