SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1225—2003 住白细胞虫病诊断方法 显微镜检查法 Protocol of diagnostic method for leucocytozoosisMicroscopic examination 行业标准信息服务平台 2003-12-01实施 2003-05-28发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1225—2003 前言 本标准的附录B是规范性附录，附录A是资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。 本标准起草人：范万红、刘友君、钟安清。 本标准属首次发布的检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1225—2003 住白细胞虫病诊断方法 显微镜检查法 1范围 本标准规定了住白细胞虫病鉴定的方法。 本标准适用于住白细胞虫病的流行病学调查、诊断、检疫和疫情监测。 2诊断原理 本标准是采用显微镜检查染色的血液涂片和器官组织切（压）片来对住白细胞虫病进行确诊的。住 白细胞虫的发育（参见附录A）包括裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖三个阶段。第一阶段及第二阶段的 大部分在家禽体内完成，第二阶段的一部分及第三阶段在吸血昆虫体内完成。不同种住白细胞虫在家 禽体内的生活史基本相同，其在禽体内的配子生殖阶段分为五个时期。如从病禽的心、肝、脑等脏器、肌 肉或血液中找到裂殖体或配子生殖中五个不同时期中任何一个时期的虫体即可确认。 3器材与试剂 3.1洁净的载玻片、盖玻片、75%酒精棉球、灭菌注射针头、研钵、棕色小口试剂瓶、染色缸、显微镜。 3.2甲醇、双蒸水、2%和10%姬姆萨氏染色液（见附录B)、中性纯甘油、生理盐水。 4操作方法 4.1血片检查法 4.1.1制备血液涂片 取无油脂的洁净载玻片数张，选择边缘光滑的载片为推片，用左手的拇指及中指夹持载片，右手持 推片。先以75%酒精棉球消毒家禽的翅下小静脉或头冠并用消毒的注射针头从消毒处采血一小滴，放 于载片的右端，将推片倾斜30℃～40℃，使其一端与载片接触并放于血滴之前，向后拉动推片，使与血 滴接触，待血液扩散形成一条线后，以均等的速度轻轻向前推动推片，使血液均匀地被涂于载片上形成 一薄膜。待血片自然干燥后，滴甲醇2滴～3滴于血膜上1min，使其固定，然后染色。 4.1.2血液涂片染色 取10%姬姆萨氏染色液加于固定好的血片上染色20min30min，然后用蒸馏水冲洗2min~ 5min，晾干后镜检。也可以将血片直立于2%姬姆萨氏染色液内过夜，取出后用蒸馏水冲洗，晾干，待 镜检。 4.1.3显微镜检查 油镜下可见红细胞变形，少数细胞破裂。在红细胞和白细胞中均有不同发育阶段的虫体（配子体）。 深的带状，环绕虫体的三分之一。整个宿主细胞呈近圆形。 4.2器官组织小结节压片检查法 4.2.1制备器官组织小结节压片 挑取肝脏、心肌、胸肌、脑或肾等处结节状小白点的病变组织一小块（米粒大小），置于载玻片上，滴 加2滴～3滴1：1甘油生理盐水，用另一载玻片按压数次，使片上组织块变薄，液体浑浊，然后盖上盖 玻片，待镜检， 1