进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验方法液相色谱法 Determination of clenbuterol and salbutamol residues in animal feed for import and exportLiquid chromatographic method SN/T 1116—2002 前言 本标准是按照GBT1.1一2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》及 要求进行编写的。其中测定方法是参考了国内外有关文献，经研究、改进和验证后制定的。本标 准同时制定了抽样和制样方法。 测定低限是根据液相色谱测定饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量方法的灵敏度而制定的。 本标准的附录A和附录B为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国湖南出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：戴华、袁智能、黄志强、陈新焕。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 1 范围 法。 本标准适用于进出口全价饲料和预混饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验。 行业标准信 2抽样和制样 2.1检验批 以不超过2000件为一检验批。 小服务 2.2抽样数量（见表1） 批量 最低抽样数 500以下 15 501~1 000 25 1 001~2 000 30 2.3抽样工具 2.3.1取样勺。 2.3.2分样板。 2.3.3分样布。 2.3.4盛样器：筒或袋，可密封。 2.4抽样方法 按2.2规定的应抽样袋数从堆垛的各部位随机抽取样袋，逐件开启。从每袋中用取样勺抽取 代表性样品约500g。将抽取样品立即倒入盛样器内。每袋所取样品的量应基本一致，每批所抽 取的样品总量应不少于4kg。 将所取样品全部倒于分样布上，用分样板按四分法缩分样品至不少于2kg。倒入盛样器内， 密封并标明标记，及时送实验室。 2.5试样制备 2.5.1制样工具 a)粉碎机。 b）筛子：2mm圆孔筛、20目筛。 c)分样板。 d)盛样器：具塞广口瓶。 2.5.2制样方法 将取回样品全部粉碎使通过2mm圆孔筛。混匀，用四分法缩分至约500g。继续粉碎使全部 通过20目筛。混匀，用四分法均分成两份，盛于盛样器内作为试样。密封并标明标记。 2.6试样保存 将试样于-5℃以下避光保存。 注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 3测定方法 3.1方法提要 试样中残留的克伦特罗、沙丁胺醇经含甲醇的盐酸溶液超声提取，液一液萃取后，用固相萃 色谱仪测定，外标法定量。 3.2试剂和材料 除特殊规定外，所有试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。 3.2.1甲醇。 3.2.2乙晴：HPLC级。 3.2.3正已烷。 3.2.485%磷酸。 3.2.60.030mol/L盐酸溶液：取300mL0.1mol/L盐酸溶液用水稀释至1000mL. 3.2.70.10mol/L盐酸-甲醇溶液：盐酸+甲醇（9+1）。 3.2.82.0mo1/L氢氧化钠溶液：称取40.0g氢氧化钠用水溶解并稀释至500mL. 3.2.9乙酸乙酯+正丁醇溶液（6+4)，用水饱和。 3.2.100.0075mo1/L磷酸二氢钾溶液：pH值3.0。溶解1.02g磷酸二氢钾于800mL水中，用磷 酸（3.2.4)调pH值至3.0，然后用水定容至1000mL。 3.2.114%（V/V）氨化甲醇溶液：取4.0mL氨水（密度0.88g/mL)用甲醇稀释至100mL。 3.2.13盐酸克伦特罗标准品：纯度≥99%。 3.2.14沙丁胺醇标准品：纯度≥99%。 3.2.15标准储备液（1000mg/L）：称取0.0570g盐酸克伦特罗（相当于0.0500g克伦特罗）于 50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度；称取0.0500g沙丁胺醇于50mL容量瓶中，用甲醇 溶解并定容至刻度，作为标准储备液。根据需要再用甲醇将标准储备液稀释成适当浓度的混合标 准工作液。 3.3仪器和设备 3.3.1高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器或紫外检测器， 3.3.2超声波水浴。 3.3.3Sep一Pak真空抽滤装置，带真空泵 3.3.4离心机：4000r/min。 3.3.5混匀器。 3.3.6 pH计。 3.4测定步骤 3.4.1提取 准确称取5.00g试样于50mL离心管中，加入20mL盐酸-甲醇溶液（3.2.7），于混匀器上混匀