出口肉及肉制品中甲酚残留量检验方法 Method for the determination of cresolum residues in meats and meat products for export SN/T1016.2—2001 前言 本标准是按照GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分： 标准编写的基本规定》及SN/T0001一1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法 标准编写的基本规定》的要求编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进和验 证后而制定的。本标准同时制定了抽样和制样方法。 测定低限是根据国际上对肉及肉制品中甲酚残留量的最高限量和测定方法的灵敏度而制定 的。 本标准的附录A是提示的附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：郑自强、朱宏、朱晓雨、唐红芳。 本标准首次发布。 1 范围 方法。 本标准适用于出口冻鸡中甲酚残留量的检验。 行业标准信息 2抽样和制样 2.1检验批 以不超过2500件为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征。如包装、标记、产地、规格和等级。 2.2抽样数量 批量/件 最低抽样数/件 1~25 1 26～100 5 101～250 10 251～500 15 501～1 000 17[ 1001~2500 20 2.3抽样方法 按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件中割取多脂肪组织作为原始样品，混合后 送交实验室。 2.4试样制备 从所取全部样品中取出有代表性样品约150g，在100℃下熔炼，然后通过玻璃纤维滤膜过 滤，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样。密封并标明标记。 2.5试样保存 将试样于一18℃以下冷冻保存。 注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 3测定方法 3.1方法提要 将经熔炼的脂肪溶于正已烷中，经氢氧化钠溶液提取后用乙酸酐进行衍生化反应，衍生化后 用正已烷提取，提取液蒸去溶剂后用正已烷溶解，所得衍生物用气相色谱-质谱法测定，外标法 定量。 3.2试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯。 3.2.1正已烷。 3.2.3乙酸酐：经全玻璃蒸馏装置蒸馏。 3.2.4氢氧化钠溶液：1mol/L和5mol/L，分别将40g和200g氢氧化钠溶于1000mL水中。 3.2.5甲酚标准品：纯度≥95%。 3.2.6甲酚标准溶液：准确称取适量的甲酚标准品，用1mo1/L氢氧化钠溶液配成浓度为100μ 服务平台 g/mL的标准储备液，根据需要再用1mol/L氢氧化钠溶液稀释储备液，配成适当浓度的标准工作 液。 3.3仪器和设备 3.3.1气相色谱仪配有质谱检测器。 3.3.2离心机。 3.3.3离心管：10mL,25mL。 3.4测定步骤 3.4.1提取和净化 称取约5g（精确至0.1g）试样（经熔炼的脂肪）于25mL离心管中，加10mL正已烷，塞上塞 子，振摇至脂肪溶解为止。加入1mL氢氧化钠溶液（5mol/L），缓缓振摇2min。再加入4mL重蒸 水，缓缓振摇1min。以1500r/min离心2min，吸去有机层（正已烷）。在水相中再加入10mL正 已烷，旋摇离心管使溶液混匀。以1500r/min离心1min，吸去有机层（正已烷）。 3.4.2酯化 在水相中加入5mL正已烷和0.3mL乙酸酐，用力振摇1min。以1500r/min离心2min，吸 取正已烷相，转入10mL离心管中。然后在水相中再加入5mL正已烷和0.3mL乙酸酐，用力振摇1 min。在1500r/min离心2min，正已烷相合并转入10mL离心管中。在60℃水浴，氮气流下将正 已烧相浓缩至约0.5mL，加正已烷定容至1.0mL，供气相色谱-质谱测定。 3.4.3标准物酯化 取适用浓度的标准工作溶液于10mL离心管中，加1mol/L氢氧化钠溶液至5mL，按3.4.2进 行酯化反应。 3.4.4测定 3.4.4.1气相色谱-质谱条件 a）色谱柱：HP-5，30m×0.25mm（id）X0.25μm熔融石英毛细管柱或相当的色谱柱； b）柱温：70℃（1 min）2chh 250℃(5 min); c）进样口温度：250℃； d）色谱-质谱接口温度：280℃； e）载气：氢气，纯度≥99.999%，流速1mL/min f）进样量：2 μL； g）进样方式：无分流进样，1min后开阀； 准信息服务平台 h）电子轰击源(EI)； i）电离能量：70eV； j）电子倍增器电压：自动调谐加200V； k）测定方式：选择离子监测方式(SIM)； 1）选择监测离子(m/z)：108，150u; m）溶剂延迟：4min。 3.4.4.2色谱-质谱测定 根据样液中甲酚含量的情况选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中甲酚衍