出口食品罐头中乙二胺四乙酸含量检验方法 Method for the determination of ethylenediaminetetra-acetic acid content in canned food for export SN/T1018—2001 前言 本标准是按照GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部 分：标准编写的基本规定》和SN/T0001一1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验 方法标准编写的基本规定》的要求编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进 和验证后制定的。本标准同时制定了抽样和制样方法。 测定低限是根据国际上对罐头食品中乙二胺四乙酸的最高限量和测定方法的灵敏度而制定 的。 本标准的附录A是提示的附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：施旭霞、丁慧瑛、陈笑梅。 本标准首次发布。 1 范围 本标准规定了出口罐头食品中乙二胺四乙酸含量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。 本标准适用于出口糖水板栗和罐装苹果汁中乙二胺四乙酸含量的检验。 行业标 2抽样和制样 2.1检验批 以不超过2500件为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征。如包装、标记、产 地、规格和等级。 2.2抽样数量 批量/件 1~25 26～100 5 101～250 10 251~500 15 501~1 000 17 1 001~2 500 20 2.3抽样方法 按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件中取1罐作为原始样品，其总量不少于2 kg。放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。 如每件中无小包装，或有小包装但每罐质量超过2kg者，可以在抽出的件中，每件取不少于 100g，混合后置于洁净容器内，作为混合原始样。混合原始样的质量不少于2kg。加封后，标明 标记，及时送交实验室。 2.4试样制备 从所取全部样品中取出有代表性样品约1kg，经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装 入洁净容器内作为试样。密封并标明标记。 2.5试样保存 将试样于-18℃以下冷冻保存。 注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 3测定方法 3.1方法提要 用水提取样品中的乙二胺四乙酸（EDTA)，过滤。加入氯化铜（II）和抗坏血酸，由此形成的 Cu-EDTA络合物经含有四丁基铵对离子剂的pH4的甲醇-水流动相分离，用液相色谱在254nm检测波 长测定，保留时间约为8.3min。由于氯化铁（II）的加入将使Cu-EDTA络合物分解，可以确证 EDTA的存在。 3.2试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 3.2.1甲醇：液相色谱溶剂。 mL。 3.2.3氯化铁（IIl)溶液：将173mg氯化铁（FeCl3·6H,0)溶于30mL冰乙酸中，用水稀释至100 信息服务平台 mL。 3.2.4抗坏血酸：纯度>99%。 3.2.5四丁基漠化铵。 3.2.6乙酸钠。 3.2.7磷酸。 3.2.8乙二胺四乙酸标准品：纯度>99%。 3.2.9乙二胺四乙酸标准溶液：准确称取适量的乙二胺四乙酸二钠，用水配成浓度为10mg/ml （以乙二胺四乙酸二钠钙计）的标准储备液，临用时用水稀释至适当浓度的标准工作液。 3.3仪器和设备 3.3.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 3.3.2捣碎机。 3.3.3超声波浴。 3.3.4容量瓶：25mL。 3.3.5滤膜：0.45μm。 3.4测定步骤 3.4.1提取和净化 中，加水至近20mL，超声提取5min，加2.5mL氯化铜溶液和抗坏血酸20mg，用水定容，混匀 后过0.45μum滤膜，清液立即供液相色谱测定。 3.4.2标准工作溶液的制备 取适量标准液置于25mL溶量瓶中，加水至近20mL，加2.5mL氯化铜溶液和抗坏血酸20mg，用 水定容，供液相色谱测定用。 3.4.3测定 3.4.3.1色谱条件 a）色谱柱：ODSHypersil5μm，125mm×4mm，或相当的色谱柱； 磷酸调节至pH=4)，0.8mL/min; 业标准信息 c）检测波长：254nm； d）进样量：20μL。 3.4.3.2色谱测定 根据样液中乙二胺四乙酸含量的情况选定峰面积相近的标准工作溶液。标准溶液和样液中乙 二胺四乙酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准溶液和样液等体积参插进样测定。 在上述色谱条件下乙二胺四乙酸的保留时间约为8.3min。标准品的色谱图见附录A中图A1。 3.4.4空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 3.4.5确证试验 在按照3.4.1处理后的样液中加入5mL氯化铁（IIl)溶液，放置20min后，在3.4.3.1色谱条件