ICS 65. 120 B 20 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 726-2003 饲料中杆菌肽锌的测定 高效液相色谱法 Determination of bacitracin zinc in feeds-- High performance liquid chromatography 行业标准信息服务平台 2003-12-01发布 2004-03-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 726-—2003 言 本标准参考了AOAC65、1168(1982)《预混料中杆菌肽锌的测定方法》和有关国内外文献，并结合 我国的实际情况制定的。 本标准的附录 A是规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心（北京)负责起草。 本标准主要起草人：高生、饶正华、范理、李丽蓓、杨曙明。 行业标准信息服务平台 NY/T 726—2003 饲料中杆菌肽锌的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了以液相色谱仪测定饲料中杆菌肽锌的方法。 本标准适用于猪、鸡添加剂预混料中杆菌肽锌含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样方法 3方法原理 添加剂预混料中的杆菌肽锌可用酸化的有机溶剂体系提取，离心，取上清液用于液相色谱分析。 4试剂和材料 以下试剂除特殊标明均为分析纯，水符合GB/T6682二级用水的规定。 4.1磷酸盐缓冲液：pH6.0,称取1.5g磷酸氢二钾和8.5g磷酸二氢钾，溶解于1L水中。 4.2磷酸盐-EDTA缓冲液：pH4.5，称取13.6g磷酸二氢钾和2.5g乙二胺四乙酸二钠溶解于1L 水中。 4.3杆菌肽锌标准液： 4.3.1标准贮备液的配制：准确称取杆菌肽锌标准品150.0mg，用提取溶液溶解，并定容100mL，此 溶液杆菌肽锌浓度为1500mg/L。 4.3.2中间液：吸取标准贮备液（4.3.1)10mL，用提取溶液定容至50mL。该溶液杆菌肽锌的浓度为 300 mg/L. 4.3.3工作液：吸取中间液（4.3.2)0.20mL、1.0mL、5.0mL，用提取溶液定容至10mL该溶液杆菌 肽锌的浓度分别为6mg/L、30mg/L、150mg/L。 4.4溶剂系统：按表1配制。各溶剂标识的体积量取各溶剂置于100mL容量瓶中，用水定容至刻度。 表1溶剂系统表 体积/mL 溶 A 溶液 B溶液 提取溶液 乙腈 0 40 28 由 0 28 磷酸盐-EDTA缓冲液 20 K20 0 磷酸盐缓冲液 0 3 浓磷酸 0 0 1. 2