ICS 65. 020. 01 NY B 36 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 713—2003 香草兰豆荚中香兰素的测定 Determination of vanillin in vanilla pods (ISO 5565-2,Vanilla,MOD) 行业标准信息服务平， 2003-12-01发布 2004-03-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 713—2003 前言 本标准修改采用ISO5562-2：1999《香英兰测试方法》（英文版）。 本标准根据ISO5562-2:1999重新起草。在附录A中列出了本标准章条编号与ISO标准5562-2： 1999章条编号的对照一览表。 考虑到我国国情，在采用ISO5562-2：1999时，本标准做了一些修改。有关技术性差异已编入正文 中并在它们所涉及的条款的页边空白处用垂直单线标识。在附录B中给出了这些技术性差异及其原 因的一览表以供参考。 本标准的附录 A、附录 B均为资料性附录。 本标准由农业部农垦局提出。 本标准起草单位：农业部热带农业产品质量监督检验测试中心。 本标准主要起草人：彭黎旭、方佳、吴莉宇、贺利民、冯信平、王明月、刘洪升。 行业标准信息服务平 平台 I NY/T 713--2003 香草兰豆荚中香兰素的测定 1范围 本标准规定了属于Vanilla fragrans(Salisbury）Ames 和 syn.Vanilla planifolia Andrews 种的 香草兰中香兰素测定方法。 本标准适用于香草兰豆英、切段和粉末中香兰素的测定。本标准不适用于香草兰豆荚抽提物中香 兰素的测定。 本标准描述了分析香兰素的三个分析方法： a）高效液相色谱法； b）紫外分光光度法； c）气相色谱法。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T12806实验室玻璃仪器单标线容量瓶 3高效液相色谱法(仲裁方法） 3.1原理 试样进行抽提和稀释，加人内标物，用高效液相色谱法(HPLC)分离，再用紫外检测器测定香兰素 的含量。 3.2 试剂 分析纯试剂、蒸馏水、去离子水或相等纯度的水。 3.2.1乙醇，95%（体积分数）。 3.2.2 甲醇。 3.2.3磷酸溶液:c(H;PO)=0.01 mol/L。 3.2.4流动相：用25份甲醇（3.2.2)与75份稀磷酸（3.2.3)混合。用膜（3.3.3)过滤、脱气。 3.2.5香兰素(4-羟基-3-甲氧基苯甲醛)为对照标样，纯度大于99%。 3.2.6内标物：乙酰水杨酸，纯度大于99%。 3.2.7香兰素储备液：称取一定量的香兰素(3.2.5),精确至0.001g。用流动相配制成为浓度为1g/L 的标准储备液。 3.2.8工作溶液 用流动相（3.2.4)稀释储备液（3.2.7），获得工作溶液，使工作溶液的浓度符合3.2.8.1中的要求。 香兰素工作溶液浓度为0.1g/L，可在4℃下暗处保存不超过10天。 3.2.9内标物溶液 将乙酰水杨酸(3.2.6)溶解于流动相（3.2.4)中，使其浓度为0.6g/L，称量时精确至0.001g。 注：内标浓度应与样品溶液中香兰素浓度基本一致。 3.3仪器 3.3.1气密研磨器。 1