ICS 11. 220 NY B 41 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 683—2003 犬传染性肝炎诊断技术 Diagnostic techniques for infectious canine hepatitis 行业标准信息服务平 2003-07-30 发布 2003-10-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 683—2003 前 言 本标准的附录 A 为规范性附录。 本标准由农业部畜牧兽医局提出并归口。 本标准起草单位：农业部兽医诊断中心。 本标准主要起草人：田克恭、王宏伟、遇秀玲、陈西钊、王传彬、杨秀勇。 行业标准信息服务平台 I NY/T 683--2003 犬传染性肝炎诊断技术 １范围 本标准规定了犬传染性肝炎(ICH)的临床诊断、犬传染性肝炎病毒(ICHV)的分离与鉴定、酶联免 疫吸附试验和免疫酶组织化学方法等诊断技术。 本标准适用于犬传染性肝炎的诊断。 2临床诊断要点 2. 1临床症状 最急性病例，患犬在呕吐、腹痛和腹泻等症状出现后数小时内死亡。急性型病例，患犬体温呈马鞍 型升高，精神抑郁，食欲废绝，渴欲增加,呕吐，腹泻，粪中带血。亚急性病例，特征性症状是患犬角膜一 过性混浊，即“蓝眼”病，有的出现溃疡。慢性病例多发于老疫区或疫病流行后期，患犬多不死亡，可以 自愈。 2.2病理变化 病犬主要表现全身性败血症变化。在实质器官、浆膜、粘膜上可见大小、数量不等的出血斑点。肝 肿大，呈斑驳状，表面有纤维素附着。胆囊壁水肿增厚，灰白色，半透明，胆囊浆膜被覆纤维素性渗出物， 胆囊的变化具有一定的诊断意义。 3病毒分离与鉴定 3.1材料准备 3.1.1试剂 3.1.1.1改良最低要素营养液(DMEM)培养基，配方见第A.1章。 3.1.1.2犬肾传代细胞(MDCK细胞)。 3.1.1.3标准阳性血清：ICHV单克隆抗体，中和抗体效价1：1024。 标准阴性血清：无ICHV感染的犬血清。 3. 1.1.4 3. 1. 1.5 新生牛血清，青霉素，链霉素。 3.1.2器材 a) 细胞培养瓶； b) 吸管； c) 二氧化碳培养箱； 37℃恒温水浴箱； （P 行业标准信息 普通冰箱及低温冰箱； e) f) 离心机及离心管； 研磨器械； g) 普通光学显微镜； j）0.45μm微孔滤膜。 3.1.3样品 ICHV存在于病犬扁桃体、肝脏、脾脏等组织器官中。无菌采集这些器官用无血清DMEM制成