ICS_,11. 220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 568—2002 肠病毒性脑脊髓炎诊断技术 Diagnostic techniques for enterovirus encephalomyelitis 行业标准信息服务 2002-12-01实施 2002-08-27发布 中华人民共和国农业部发布 NY/T 568-2002 前言 本病属于细小核糖核酸病毒科的肠道病毒属肠道病毒 I 型(简称PEV)。病毒主要感染动物的中枢 神经系统并繁殖，使运动神经节细胞变性，导致非化脓性脑脊髓炎。此病多见于哺乳仔猪和断奶仔猪，成 年猪多为隐性感染，引起发烧、厌食、共济失调、四肢麻痹和李，该病的发病率和死亡率都很高，造成严 重的经济损失。 肠病毒性脑脊髓炎（Enterovirus encephalomyelitis），曾称做捷申/塔尔凡氏病（Teshen/Talfan dis- ease），是猪的一种严重病毒性传染病，被世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health （英），OfficeIntentionaldesEpizootic（法），OIE和我国农业部分别列为B类和二类动物疫病。 本标准是依据OIE《诊断试验和疫苗标准手册》（2000年版）（Manual of StandardsforDiagnostic TestsandVaccines，2000)第2.6.3章规定的主要技术制定的。两者的主要差异是： 本标准根据本国和国外实践经验规定了使用主要致病原PEV-1型病毒作为抗原，未采用2-13 型PEV,未采用酶联免疫吸附(ELISA)技术； 一本标准根据本国实践经验将操作程序更加具体化。 本标准附录A、附录B是规范性附录。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：农业部动物检疫所。 本标准主要起草人：封启民、李昌琳。 行业标准信息服务平 NY/T 568—2002 肠病毒性脑脊髓炎诊断技术 1范围 本标准规定了(猪)肠病毒性脑脊髓炎诊断技术要求。 本标准适用于(猪）肠病毒性脑脊髓炎的病原鉴定及流行病学检查，进出口检疫和免疫抗体的检测。 21 临床症状检查 临床上分为四个型，即急性型、亚急性型、慢性型和温和型，此外还有无症状仅检出抗体的隐性感 染，根据临床症状和病理变化(见第3章)可作出怀疑性诊断。 该病潜伏期为 2 d～28 d。 2.1急性型 病猪首先出现体温升高，多在40.0℃～41.1℃左右或更高，病猪表现为厌食、倦怠、呕吐、严重鼻 炎、腹泻及行动失调。发病1d～2d后，体温降至正常，出现中枢神经系统症状，如寒战、感觉过敏、抽 搐、共济失调、四肢直（特别是后肢）、角弓反张和昏迷，接着发生麻痹，病猪呈犬坐姿或于一侧卧地，前 肢作划水样，受声响或触摸刺激时，可引起四肢不协调运动，或角弓反张，也可见面部麻痹和失音。病猪 发生便秘。传染性脑脊髓炎的病程发展迅猛，瘫痪出现后的2d～3d,就有80%～95%的病猪可因呼吸 中枢麻痹而死亡，有些病猪死于吸入性肺炎，有些病例急性期之后食欲有所恢复，但见消瘦并伴有麻痹 症状。 2.2亚急性型 病程为6d～8d,症状与急性型相似,但较轻缓,死亡较少。 2.3慢性型 多发于成年猪，病程为几周到几个月，特征为沉郁、行动困难，尾部麻痹、前肢瘫痪，其中有20%的 病猪因肺炎、褥疮、败血症等原因死亡。 2.4温和型 毒力较低的毒株引起，症状较轻，发病率和死亡率较低，主要侵害仔猪。病初体温升高，运动失调。这 些症状大多在几天内消失，但有些病猪则随后出现兴奋、发抖、平衡失调、运动失调，最后麻痹等症状。 3组织病理学检查 组织学诊断采集的样品有大脑、小脑、间脑、延髓和颈腰部脊髓。这些样品用甲醛固定，制成切片，用 常规组织学方法染色，显微镜检查可发现血管周围非化浓性淋巴细胞浸润，浸润现象限于灰质部，偶尔 波及白质部。间脑和小脑有明显的变化；大脑半球较轻，病的后期神经元细胞变性，并被胶质结缔组织细 胞代替；常见非化浓性脑脊髓炎，特别是在小脑部分。 服务平 4病毒分离及鉴定 4.1材料准备 4.1.1病料的采集 将发病期的猪扑杀，用无菌操作法取脑和脊髓样品，放在pH7.2的磷酸甘油缓冲液(PBS)中(PBS 1