ICS _11. 220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 573— 2002 弓形虫病诊断技术 Diagnostic techniques for toxoplasmosis 行业标准信息服务平台 2002-08-27发布 2002-12-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 573—2002 前 言 弓形虫病是由刚第弓形虫(toxoplasma gondii)引起的一种人畜共患寄生虫病。该病呈世界性分布， 各种家畜，包括猪、牛、羊、犬、猫和实验动物，包括小白鼠、天竺鼠、家兔等，以及人类，都能感染弓形虫。 弓形虫病可使孕畜流产死胎，急性弓形虫病可造成家畜的死亡。弓形虫感染孕妇后可引起流产，胎儿畸 形或产出弱智儿。弓形虫感染成人后，可侵害神经系统、呼吸系统、心脏、淋巴内皮系统等多种器官或系 统，并造成损伤，严重时会造成死亡。因此，弓形虫病具有重要的公共卫生意义。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国农业大学、中国农业科学院兰州兽医研究所。 本标准主要起草人：汪明、杜重波、潘保良、刘群。 行业标准信息服务平 NY/T 573—2002 弓形虫病诊断技术 1 范围 本标准规定了弓形虫病的诊断技术要求。 本标准所规定弓形虫的分离鉴定适用于本病的确诊；间接血凝试验适用于大批量样品的普查。 2弓形虫的分离鉴定 2.1材料准备 2.1.1器材：玻璃组织研钵，无菌砂子，5mL注射器及针头。 2.1.20.8%生理盐水：加人青霉素和链霉素，使其终浓度分别为100IU/mL和10μg/mL。 2.1.3 蛋白酶。 2.1.4健康实验小白鼠27只。 2.2待检样品的采集及处理 无菌采取病畜的脑组织、心、肝、肺、肾、骨骼肌各2g，以及3mL腹腔液，所取组织或器官材料分别 放人玻璃组织研钵中，加入无菌砂子和0.8%的无菌盐水进行研磨，研磨成组织麋。研磨好的组织（器 官），用0.8%的盐水配制成10%～20%的组织悬浮液。肺组织和肌肉组织悬浮液加人蛋白酶消化。消 化后的组织悬浮液用于接种，腹腔液不用处理可直接接种。 2.3操作方法 接种：选取27只健康试验用小白鼠，分为9组，每组3只，作如下处理： 空白对照组（1组）：不作任何处理； 生理盐水接种组（1组）：每只小鼠腹腔接种生理盐水1mL； 病料接种组（共7组）：每只小鼠分别腹腔接种2.2所制备的待检样品1mL。 2.4检查与判定 小鼠接种待检样品后，如在2d～14d内发生死亡，则应抽取腹腔渗出液涂片镜检。同时另采集脑、 肝、肺、脾涂片，涂片进行姬姆萨染色后用显微镜镜检。若小鼠未发生死亡，则应在接种后的6～8周对小 鼠进行捕杀，并按上述方法取样镜检。若在小鼠腹腔液中查出速殖子1)或所取的组织样品中查出包囊2) 或缓殖子3,则可将待检样品判为阳性。没有查出则判为阴性。 当空白对照组和生理盐水接种组没有查出弓形虫时，可进行结果判定，否则应重检。当所检样品中， 有一个为阳性，即说明被检动物已被弓形虫感染，将其判为阳性；当所检样品全部为阴性时，将被检动物 判为阴性。 1）速殖子呈月芽形，长为4 μm～8 μm,宽为2 μm～4 μm。包囊呈球形，囊壁薄,直径为25 μm～100 μm。 2）包囊内往往充满圆形或月芽状的缓殖子，缓殖子长为3μm，宽为2μm～3μm。 3）缓殖子对姬姆萨染液高度敏感，呈嗜碱性。 1