ICS_ 11. 220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 559—2002 禽曲霉菌病诊断技术 Diagnostic techniques for avian aspergillosis 行业标准信息服务平台 2002-08-27 发布 2002-12-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 559—2002 前言 禽曲霉菌病(avian aspergillosis)是多种禽类、哺乳动物和人畜共患的一种真菌病。主要侵害呼吸系 统，在肺和气囊发生炎症和小结节，导致呼吸困难，甚至室息死亡。病原体主要为曲霉属（Aspergillus)中 的烟曲霉（A.fumigatus)和黄曲霉（A.flavus）,其次为构巢曲霉（A.nidulans）、黑曲霉（A.niger）和土曲 霉（A.terreus)等。本病发生于世界各地，对维鸡的危害最大，可引起幼维大批死亡，造成重大经济损失。 对曲霉菌病的诊断，近年来提出了一些新技术。但是，各国确定的常用方法，仍是本标准规定的病理 学检查和病原学检查。病理学检查(包括在病变组织内发现曲霉菌)可以确定病性，病原学检查不仅可以 提高诊断率,而且能够鉴定曲霉菌菌种。 国际上无相应的诊断标准或规范可供参照。本标准的实施，对提高我国禽曲霉菌病的诊断水平，保 证养禽业健康发展，将起到重要的作用。 本标准的附录A、附录B为规范性附录。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国人民解放军军需大学。 本标准主要起草人：宣华、向华。 行业标准信息服务平台 NY/T 559—2002 禽曲霉菌病诊断技术 1 范围 本标准规定了禽曲霉菌病病理学和病原学检查的技术要求。 本标准适用于禽(鸟)类曲霉菌病的诊断和检疫。 2 病理学检查 2.1材料准备 2.1.1器材 小动物解剖器具，灭菌试管（供采集真菌学检查样品用），普通显微镜等。 2.1.2试剂 体积分数为10%的甲醛溶液，30%甘油缓冲溶液，其配方见附录A。 2.2尸体剖检方法 按照常规的禽类尸体剖检术式，将可疑病禽的各内脏器官取出，逐一检查。重点检查呼吸系统。如 发现可疑病变，先取1份置于无菌中试管内或30%甘油缓冲溶液（见第A.1章）中，供病原学检查用，再 取1份置入10%甲醛溶液内，供病理组织学检查用。 2.3主要病理变化 禽曲霉菌病的病变主要见于呼吸系统，在肺脏和气囊形成数量不等、粟粒大至绿豆粒大的结节，结 节质地较硬，切面呈同心圆轮层状。显微镜检查，见结节周边为淋巴细胞、多核巨细胞和成纤维细胞构成 的肉芽组织，中央为干酪样坏死区，内含大量的霉菌菌丝。可在气囊、气管、支气管、肺脏及腹膜表面形成 大小不一的霉菌斑，菌斑上有灰绿色粒状物或绒球状物。此外，有时在眼脸内、肝、脾、肾、消化系统乃至 神经系统表面也能发现类似的结节或菌斑病变。 3病原学检查 3.1材料准备 3.1.1器材 载玻片，盖玻片，培养皿，铂金耳或针，恒温箱，手术刀，普通显微镜等。 3.1.2试剂 20%氢氧化钾溶液，乳酸酚棉蓝染色液，沙保劳（Sabouraud)氏葡萄糖琼脂培养基或改良察贝克 (Czapek)氏琼脂培养基等,其配制方法见附录A。 3.1.3样品采集 对病理学检查可疑的病禽，应无菌操作采取带有病变（如结节、霉菌斑等)的组织各数小块，置于灭 菌容器（如中试管）内冷藏，并尽快送检，如果不能立即送检，可暂时保存于30%甘油缓冲液中。 3.2检查方法 3.2.1压滴标本法 取结节置于载玻片上，用手术刀切开，由切面刮取干酪样坏死组织，或由病变组织表面刮取霉菌斑， 或用铂金针钩取纯培养物置于载玻片中央，加1～2滴乳酸酚棉蓝染色液或生理盐水，用大头针将组织 块或菌团撕扯开，压上盖玻片（注意勿产生气泡），制成压滴标本。如果组织碎块较硬，可改用1～2滴 1