ICS_11. 220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 558—2002 牛海绵状脑病诊断技术 Diagnostic techniques for bovine spongiform encephalopathy 行业标准信息服务平台 2002-08-27发布 2002-12-01实施 中华人民共和国农业部 5发布 NY/T 558—2002 前言 牛海绵状脑病是动物传染性海绵状脑病的一种，对动物和人有着持久性危害并最终致死，世界动物 卫生组织[World Organization for Animal Health(英),Office Intentional des Epizootic(法),OIE］将之 列为B类动物疫病,我国将其定为一类动物疫病。 本标准是依照OIE的《诊断试验和疫苗标准手册》（2000年版）（Manual of standards forDiag nositic Tests and Vaccines,2000)第 2.3.13章关于牛海绵状脑病的诊断技术规定制定的。本标准与该 文件的差异是： 本标准中除症状描述(临床诊断)外，采用该文件规定的两项主要技术即组织病理学诊断和免 疫组织化学诊断技术，其他推荐技术未采用； 由于《诊断试验和疫苗标准手册》对上述两项技术的具体操作程序未作规定，本标准采用了 OIE传染性海绵状脑病瑞士参考实验室（OIETSEReferenceLaboratory，Instituteof Animal Neurology,University of Bern,Switzerland)的操作程序。 本标准的附录 A、附录B、附录 C为规范性附录。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：农业部动物检疫所。 本标准主要起草人：王志亮、刘雨田、邹艳丽、王树双。 行业标准信息服务平 NY/T 558—2002 牛海绵状脑病诊断技术 1范围 本标准规定了诊断牛海绵状脑病(BSE)的技术要求。 本标准适用于牛海绵状脑病的诊断；也可用于其他动物的传染性海绵状脑病(TSE)的诊断。 2 临床诊断 BSE病牛临床症状各种各样,病程多为数月至一年,最终死亡。当病牛出现以下全部或部分症状而 又不能确定为其他疾病时,应怀疑 BSE的可能。 或进入畜栏等。 b) 感觉或反应过敏：表现为触、视、听三觉过敏。对颈部触摸、光线的明暗变化以及外部声响过度 敏感，这是BSE病牛重要的临床表现。 c）运动异常：病牛步态呈“鹅步”状，共济失调，四肢伸展过度，有时倒地，难以站立。 d）体重和体况下降。 其他动物的TSE临床症状不尽相同,但确诊须依靠实验室诊断。 3实验室诊断 发现可疑病例后，应进行采样，送专门实验室检测。 3.1采样 将牛头固定，用电锯从前额两牛角根部向枕骨大孔背侧缘方向锯开，使脑部暴露。用剪刀剪开脑膜 并切断所有与脑部相连的神经和血管，取出整脑。大规模监测时，可用专用工具从枕骨大孔处，取出延脑 部分即可。 3.2固定 将完整的脑组织浸人10倍体积的固定液(配方见附录A)中固定。一周后更换固定液，再维持一周。 3.3组织病理学诊断 3.3.1病料处理 3.3.1.1把固定好的脑组织取出，将大脑和小脑去除，横切脑干选取厚度为3mm～5mm的脑闫部延 髓、小脑后脚部延髓和前丘部中脑组织块。 3.3.1.2将选取好的组织块放入新配的固定液中再固定一周，其间更换固定液三次，并在水平摇床上 不断摇荡，以提高固定液的渗透力。 3.3.1.3将固定好的组织块放人流水中漂洗24h。 息服务平 3.3.1.4放人下列不同浓度的酒精中脱水： a）75%酒精中2h； b）85%酒精中2h； 95%酒精1中2h； c） d）95%酒精Ⅱ中2 h; e）100%酒精1中2h;