ICS 65.02C B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2377—2013 葡萄病毒检测技术规范 Code of practice for the detection of grapevine viruses 行业标准信息服务平台 2013-09--10发布 2014-01-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 23772013 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出。 本标准由全国果品标准化技术委员会（SAC/TC510）归口。 本标准起草单位：中国农业科学院果树研究所、农业部果品及苗木质量监督检验测试中心（兴城）。 本标准主要起草人：董雅凤、张尊平、范旭东、任芳、刘凤之、聂继云。 行业标准信息服务平台 I NY/T 2377—2013 葡萄病毒检测技术规范 1范围 本标准规定了葡萄主要病毒检测技术的术语和定义、检测对象、检测方法和检测结果的判定。 本标：准适用于葡萄接穗、插条、苗木、组培苗、田间植株中主要葡萄病毒的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T1843葡萄无病毒母本树和苗木 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 葡萄无性繁殖材料grapevineasexualpropagationmaterials 用于嫁接繁殖葡萄苗木的接穗或扦插繁殖葡萄苗木的插条。 3. 2 葡萄苗木grapevinenurserystock 采用品种接穗和砧木嫁接繁育的葡萄嫁接苗，以及通过扦插、组织培养等方法繁育的葡萄自根苗。 3.3 葡萄组培苗grapevine nursery stockfromtissueculture 指利用葡萄外殖体，在无菌和适宜的人工条件下，培育的完整植株。 3. 4 指示植物indicatorplant 是指被某种或某类病毒侵染后，在适宜的环境条件下，能够表现典型症状的寄主植物。 3.5 酶联免疫吸附测定 在固相支持物上（酶联板）包被病毒特异性抗体，加人待测样品后，再用酶标记的病毒抗体进行免疫 识别，最后通过酶与底物的颜色反应检测病毒是否存在的一种血清学检测方法。 3. 6 逆转录聚合酶链式反应reversetranscription-polymerasechainreaction（RT-PCR） 利用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA，再以此为模板并以耐热DNA聚合酶和一对引物（与待测 目标核酸分子序列同源的DNA片段）通过高温（DNA分子变性）和低温（引物和目标核酸分子复性并 被耐热DVA聚合酶延伸）交替循环扩增待测目标核酸分子的方法。 4检测对象 4.1葡j扇叶病毒（Grapevinefanleafvirus,GFLV) 4. 2葡j卷叶相关病毒 1(Grapevine leafroll-associated virus 1,GLRaV-1) 4.3葡i卷叶相关病毒2(Grapevineleafroll-associated virus2,GLRaV-2) 1