ICS 65.020.30 B 41 Sc 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 7206.3--2007 牡蛎单孢子虫病诊断规程 第3部分：原位杂交诊断法 Diagnostic Protocols for Haplosporidiosis of Oyster- Part 3: in situ Hybridization Method 行业标准信息服务平台 2007-06-14发布 2007-09-01实施 中华人民共和国农业部 5发布 SC/T 7206.3—2007 前言 SC/T7206《牡蛎单孢子虫病诊断规程》分为三个部分： -第1部分：组织印片的细胞学诊断法； -第2部分：组织病理学诊断法； 第3部分：原位杂交诊断法。 本部分为SC/T7206的第3部分。 本部分的附录A为规范性附录。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国水产标准化技术委员会归口。 检疫局。 本部分主要起草人：杨冰、黄健、陈爱平、江育林、王崇明、王秀华、魏琦、刘莉。 行业标准信息服务平台 I SC/T 7206.3—2007 牡蛎单孢子虫病诊断规程 第3部分：原位杂交诊断法 1范围 SC/T7206的本部分规定了牡蛎尼氏单孢子虫病的原位杂交诊断方法的原理、试剂与材料、仪器设 备、操作步骤和结果判定。 本部分根据尼氏单孢子虫在组织中的定位与感染程度对牡蛎单孢子虫病进行确诊。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 SC/T 7202.3-2007 斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分:组织病理学诊断法 SC/T 7205.1-2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法 SC/T 7206.1—2007牡蛎单孢子虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法 3原理 3.1牡蛎尼氏单孢子虫及其病理学特征 见SC/T7206.1一2007（牡蛎单孢子虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法)中3.1 的规定。 3.2技术原理 的WSSVDNA进行核酸分子杂交,并通过抗原－抗体反应和酶一底物的化学显色反应在组织切片上 显示出WSSV的存在位点。原位杂交可完整地保持组织与细胞的形态,能在复杂的组织中针对单一细 胞进行病毒检测,准确地反映出组织细胞中病毒的分布。 4试剂和材料 4.1除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 4.3碱性磷酸酶偶联的DIG抗体(AP-抗DIG,0.75U/μL,4℃）:生化试剂。 4.4二甲苯。 4.5无水乙醇。 4.695%乙醇。 4.7中性树胶：生物染色用。 4.8石蜡（熔点52℃～54℃）：切片级 4.9戴维森氏AFA(Davidson'sAFA)固定液按SC/T7202.3—2007（斑节对虾杆状病毒病诊断规程 第3部分：组织病理学诊断法)附录A的规定。 1