ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3196—2018 热带作物病虫害检测鉴定技术规程 芒果畸形病 Technical code of practice for detection and identification of tropical crop diseases and insect pests- Mango malformation disease 行业标准信息服务平台 2018-03-15发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T3196—2018 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部农垦局提出。 本标准由农业部热带作物及制品标准化委员会归口。 本标准起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。 本标准主要起草人：蒲金基、张贺、漆艳香、张欣、喻群芳、谢艺贤、陆英、张辉强。 行业标准信息服务平台 NY/T3196—2018 热带作物病虫害检测鉴定技术规程 芒果畸形病 1 范围 本标准规定了芒果畸形病病原菌芒果镰孢菌（FusariummangiferaeBritz，WingfieldetMara- sas)鉴定方法。 本标准适用于芒果镰孢菌的检测！ 2 鉴定原理 PUBL 依据芒果镰孢菌特有 寄主上的危害症状（参 见附 见附录B 检测鉴定方 法 4.1症状诊断与 芒果树白 姨 按附录 取该嫩梢或花序 纸袋 做样本，装入 4.2PCR检测 4.2.1基因组 见附录B 4.2.2引物及扩 进行PCR 因级 在PCR管 110XCR缓冲 液(Mg2+Plus)2. R各0.5μL（见表 特 R 超合水 1),Taq酶0.2μL, 物序列及扩增产 物长度 PCR 引物名称 引物 预期扩增产物长度 1-3F 5-TGCAGA1 TTCTGC 589bp 1- 3R 5-GGAACATTGGGCAAAACTAC-3 反应条件：95℃预变性3min，后30个循环为95℃变性40s；58℃退火45s；72℃延伸1min；最后 72℃延伸10min。取出PCR反应管，对反应产物进行电泳检测或4℃条件下保存，存放时间不超过 24h。 4.2.3 反应体系中的对照设置 以病原菌Fusariummangiferae基因组DNA作为模板的为阳性对照；以健康芒果果实种胚组织 提取的基因组DNA作为模板的为样品阴性对照；以配制反应体系的无菌超纯水代替DNA模板的为 PCR反应体系阴性对照。 1