ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2309—2013 黄曲霉毒素单克隆抗体活性 鉴定技术规程 Technical rules for activity identification of monoclonal antibodies against aflatoxins 行业标准信息服务平台 2013-05-20发布 2013-08-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T2309—2013 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院油料作物研究所、农业部油料及制品质量监督检验测试中心。 本标准主要起草人：李培武、李冉、丁小霞、周海燕、张奇。 行业标准信息服务平台 I NY/T 2309—2013 黄曲霉毒素单克隆抗体活性鉴定技术规程 1范围 本标准规定了黄曲霉毒素单克隆抗体的活性鉴定方法。 本标准适用于黄曲霉毒素单克隆抗体的活性鉴定， 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3试剂 除非另有说明，均使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水。 3.1碳酸钠（Na2CO）：分析纯。 3.2碳酸氢钠（NaHCO3）：分析纯。 3.3十二水合磷酸氢二钠（Na2HPO·12H,O）：分析纯。 3.4磷酸二氢钾（KH2PO.）:分析纯。 3.5氯化钠（NaCI)：分析纯。 3.6氯化钾（KCI)：分析纯。 3.7柠檬酸(CH,O·HzO)：分析纯。 3.8过氧化氢尿素[CO(NH2)2·H2O2]:分析纯。 3.9黄曲霉毒素完全抗原：纯度≥98%。 3.10卵清白蛋白（Ovalbumin，OVA)。 3.113,3,5,5-四甲基联苯胺（3,3,5,5"-Tetramethylbenzidine,TMB)。 3. 12 2甲醇（CH3OH)：分析纯。 3.13无水乙醇(CH;CH2OH)：分析纯。 3.14 吐温-20(Tween-20)。 3.15羊抗鼠IgG辣根过氧化物酶标二抗。 3.16黄曲霉毒素标准品（黄曲霉毒素B、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素 G1、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素 M，即AFBI、AFB2、AFG、AFG2、AFM,)：纯度≥99%。 3.17黄曲霉毒素标准储备液：准确称取黄曲霉毒素Bi黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G、黄曲霉毒素G2 和黄曲霉毒素M，标准样品，用甲醇（3.12）配制成0.100mg/mL的储备液。 3.18黄曲霉毒素标准工作液：准确移取黄曲霉毒素B、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2 和黄曲霉毒素M,标准储备液，用甲醇稀释成工作液（浓度均为：0.01ng/mL、0.1ng/mL，1ng/mL、 10 ng/mL和 100 ng/ mL)。 3.19磷酸盐缓冲液（PBS缓冲液）：称取2.9gNazHPO,·12H2O.0.2gKHzPO4、8.0gNaCI和0.2g KCI溶于纯水并定容至1L超纯水中，调pH至7.4。 3.20磷酸盐吐温缓冲液(PBST缓冲液）：称取2.9gNa2HPO,·12H,O、0.2gKHzPO4、8.0gNaCI 1