ICS 65.020 B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2286—2012 番茄溃疡病菌检疫检测与鉴定方法 Detection and identification for Clavibacter michiganensis subsp michiganensis(Smith) Davis et al. 行业标准信息服务平台 2012-12-24发布 2013-03-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2286—2012 前言 本标准按照GB1.1给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）归口。 本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、贵州省植保植检站、贵州省植物保护研究所。 本标准主要起草人：王福祥、张忠民、袁洁、熊红利、吴石平、杨学辉、江兆春、耿坤、郑松、毛东、刘新。 行业标准信息服务平台 NY/T2286—2012 番茄溃疡病菌检疫检测与鉴定方法 1范围 本标准规定了农业植物检疫中番茄溃疡病菌检疫检测及鉴定的技术方法。 本标准适用于番茄溃疡病菌的检疫检测及鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件·其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB15569农业植物调运检装规 ON 3术语和定义 RESE 文 下列术语和定义适用于 文件 S 3. 1 鸟眼斑 色早圈 番茄溃疡病离 南侵染 果实上出现圆形中英治 形似鸟眼状的病 茄果实后 我褐色 边缘为 RCH UR 斑。 3.2 溃疡斑 番茄溃疡病 侵染 黄色至红褐色粉 4原理 香加贵 从密茄育苗到收获期均可发生 番茄溃疡病是 菌主要以带菌种 系统洗 水孔等自然孔口侵 子远距离传播。病种 植株和果实被侵染后，分别出现”溃疡球天 成系统侵殊 马眼斑”的典型为害症 人植株，造成局部侵 菌落特征、酶联免疫双抗体夹心法（DA ELISA)以及聚合酶链式 状。该病原菌为害番茄的典型症状、 反应（PCR）检测结果是鉴定该病菌的依据 5试剂与材料 碳酸氢钠（NaHCO）、碳酸钠（Na,CO3）、叠氨化钠（NaN3）、无水磷酸氢二钠（NazHPO）、氯化钾 （KCI）、无水磷酸二氢钾（KH2PO）、无水磷酸氢二钾（KH,PO）、氯化钠（NaCI）、无水亚硫酸钠 （NazSO）、氯化镁（MgCl2）、七水硫酸镁（MgSO：7H,O）、硼酸（H.BO）等。 DAS-ELISA检测试剂（包被抗体、酶标抗体、包被缓冲液、PBST洗涤液、样品提取缓冲液、酶标抗 体缓冲液、底物对硝基苯磷酸二钠、底物缓冲液、终止液）与mSCM选择培养基制备方法参见附录B。 除另有规定，所有试剂均为分析纯或生化试剂。实验用水应符合GB/T6682中一级水的规格。 6仪器及用具 PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、酶标仪、恒温震荡仪、台式离心机、高压灭菌器、超净工作台、生化 1