ICS11.220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1466—2018 代替NY/T1466—2007 动物棘球呦病诊断技术 Diagnostic techniques for animal echinococcosis 行业标准信息服务平台 2018-06-01实施 2018-03-15发布 中华人民共和国农业部 发布 NY/T1466—2018 目 次 前言 引言 范围· 规范性引用文件 临床诊断 3.1流行病学 3.2临床症状 3.3棘球蜘病病理组织学诊断 3.3.1检 3.3.2病理组织学变化 3.3.2.1肝细粒棘球蜘病病理变化 3.3.2.2 肺细粒棘球蝴病病理变化 3.4结果判定 4实验室诊断 4.1间接红细胞凝集试验（IHA） 4.1.1材料 4. 1. 1. 1 待检血样的采集 4.1.1.2 血清分离与保存 4.1.1.3 对照阳性血清 4.1.1. 4 对照阴性血清 4.1.1.5 IHA诊断液制备 4.1.1.6 微量反应板 4.1.2 操作方法… 4.1. 2.1 稀释被检血清 4.1.2.2 加诊断液（抗原）。 4.1.2.3 设对照· 4.1.2.4 血凝反应 4.1.3 判定 4. 1. 3. 1 判定标准 4.1.3.2 结果判定 4.2酶联免疫吸附试验（ELISA） 4.2.1仪器 4.2.2 耗材 4.2.3试剂 4.2.3.1 血样的采集、血清分离与保存 4.2.3.2 抗原. 4.2.3.3 对照阳性血清 4.2.3.4 对照阴性血清 NY/T1466—2018 4.2.3.5 抗免疫球蛋白-酶结合物 4.2.3.6 试验溶液 4.2.4 操作方法· 4.2.4.1 抗原包被 4.2.4.2 洗涤· 4.2.4.3 封闭， 4.2.4.4 加待检血清 4.2.4.5 加抗免疫球蛋白-酶结合物 4.2.4.6 显色· 4.2.4.7 终止反应 4.2.5判定 4.2.5.1 计算， 4.2.5.2 结果判定 4.3家畜与野生动物棘球蜘感染PCR诊断 4.3.1试验材料 4.3.1.1 仪器， 4.3.1.2 试剂. 4.3.2操作程序 4.3.2.1 棘球蜘可疑包囊病灶采集 4.3.2.2 待检样本的处理 4.3.2.3 基因组 DNA的提取 4.3.2.4 基因组DNA含量测定· 4.3.3PCR操作方法 4.3.3.1 引物选用 4.3.3.2 反应体系 4.3.3.3 PCR反应产物的观察 4.3.3.4 结果判定 5诊断结果判定 附录A（资料性附录） 三种棘球综虫病原学与流行病学特征比较 附录B（资料性附录） 棘球呦包囊及囊液中原头呦的形态学观察 附录C（规范性附录） IHA诊断液配制方法 附录D（规范性附录） 棘球囊液醋酸盐纯化抗原制备方法 附录E（规范性附录） 抗免疫球蛋白-酶结合物的制备方法 12 附录F（规范性附录） ELISA溶液配制 附录G（规范性附录） 电泳相关试剂的配制 91 附录H（资料性附录） 基因组DNA提取方法 17 附录I（资料性附录） 棘球终虫PCR检测方法相关信息 18 附录J（规范性附录） 三种棘球虫特异性多重PCR扩增产物电泳图 Ⅱ