ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 918--2004 饲料中雌二醇的测定 高效液相色谱法 Determination of estradiol in feed --High-pressure liquid chromatography 行业标准信息服务平台 2005-02-01实施 2005-01-04发布 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 918-2004 前言 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准负责起草单位：农业部饲料质量监督检验测试中心（沈阳）、国家饲料质量监督检验中心（北 京）。 本标准起草人：张建勋、曹东、董永亮、苏晓欧、田颖、李雪兰、孟庆文、李永才、田晓玲。 行业标准信息服务平台 I NY/T 918—2004 饲料中雌二醇的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了以高效液相色谱仪(HPLC)测定饲料中雌二醇含量的方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混料中雌二醇含量的测定，本方法检测限为1mg kg。 2规范性引用文件 下列文件的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是 否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682-1992分析实验室用水规则和试验方法 GB/T14699.1饲料采样方法 3原理 用甲醇提取饲料中的雌二醇，取部分提取液过C18萃取柱，用水淋洗杂质，乙腈洗脱，以乙腈+水 （40+60)为流动相，用高效液相色谱仪于280nm处检测。 4试剂和溶液 除特殊注明外，本法所用试剂均为分析纯。 水应符合GB/T6682—-1992一级水规定。 4.1乙腈 色谱纯。 4.2甲醇 4.3雌二醇标准液 4.3.1雌二醇标准贮备液：准确称取雌二醇（纯度≥98%)0.0250g，置于100mL容量瓶中，用甲醇溶 解、定容，其浓度为250μg/mL的贮备液，置4℃冰箱中保存。 4.3.2雌二醇标准工作液：分别准确吸取一定量的标准贮备液（4.3.1），置于容量瓶中,用甲醇稀释、定 容,配成浓度为 2.5 μg/mL,5.0 μg/mL,10.0 μg/mL,12.5 μg/mL,15.0 μg/mL,20.0 μg/mL,25.0 μg/ mL的标准工作液。 行业标准信息服务平台 5仪器和设备 5.1高效液相色谱仪 紫外检测器。 5.2分析天平 感量为0.0001g。 5.3天平 感量为0.001g。 5.4震荡器 1