ICS 11.220 B 42 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 908—2004 羊干酪样淋巴结炎诊断技术 Diagnotic technique for caseous lymphadenitis in sheep and goat 行业标准信息服务平台 2005-01-04发布 2005-02-01实施 中华人民共和国农业部 阝发布 NY/T 908--2004 前言 本标准的附录A、附录B为规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：西北农林科技大学。 本标准主要起草人：张彦明、邢福珊。 行业标准信息服务平 NY/T 908—2004 羊干酪样淋巴结炎诊断技术 1范围 本标准规定了羊干酪样淋巴结炎(caseous lymphadenitis in sheep and goat,简称CLA)病原菌分离与 鉴定和酶联免疫吸附试验2种检疫方法。 本标准规定的病原菌分离与鉴定适用于羊干酪样淋巴结炎的诊断，酶联免疫吸附试验适用于羊干 酪样淋巴结炎的诊断、检疫及流行病学调查。 2病原菌分离与鉴定 2.1发病特征和病理变化 发病羊的淋巴结肿大,呈脓性干酪性坏死,病羊消瘦,生产性能下降,孕羊产出死胎,严重者死亡。 在发病羊的肺、肝、脾和子宫角发生大小不等的结节，内含淡黄色干酪样物质。 2.2培养基 鲜血琼脂，血清琼脂，葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、甘露糖、淀粉、蕈糖发酵培养基，含0.2%吐温-80的 马丁肉汤，成分和制备方法见附录A。 2.3病料的采取 按无菌操作方法用18号以上的针头和注射器采取淋巴结中干酪样脓汁，作为病原菌分离与鉴定的 病料。 2.4分离培养 2.4.2若在血液琼脂平板上出现黄白色、不透明、凸起、表面无光泽的菌落，初分离时菌落周围有狭窄 溶血环,则判为可疑菌落。 2.4.3若在血清琼脂平板上出现细小的颗粒样、半透明、边缘不整齐、干燥、松脆的菌落，则为可疑菌 落。 2.4.4将上述可疑菌落涂片,用革兰氏染色法染色、镜检。若见有革兰氏阳性、呈球形或细丝状、一端 或两端膨大呈棒状的细菌，排列不规则，常呈丛状或栅栏状，则为可疑伪结核棒状杆菌，需进一步做生化 试验。 2.5生化试验 将可疑菌落纯培养后,接种于2.2中的各种糖发酵培养基试管中,37℃培养24h,若葡萄糖、乳糖、 麦芽糖、甘露糖发酵产酸不产气，而淀粉、蕈糖不发酵，则判定为伪结核棒状杆菌。 行业标准信息服务平台 3酶联免疫吸附试验(ELISA) 3.1抗原制备 见附录B.1。 3.2各种液体的配制 见附录 B.2~B.6。 3.3酶标抗体和血清 3.3.1酶标兔抗羊IgG 购买酶标兔抗羊IgG,用时以稀释缓冲液作1:4000稀释。 1