ICS 67.050 X 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 8292004 牛奶中氨芒青霉素残留检测方法 -HPLC Determination of ampicillin residue in milk: HPLC 行业标准信息服务平台 2004-08-25发布 2004-09-01实施 中华人民共和国农业部 3发布 NY/T 829—2004 前言 本标准的附录A为资料性附录,附录B为规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。 本标准起草单位：农业部饲料质量监督检验测试中心（广州）。 本标准主要起草人：罗道棚、曾平、肖田安、邓国东。 平台 I NY/T 829--2004 牛奶中氨芙青霉素残留检测方法 一HPLC 1 范围 本标准规定了牛奶中氨芊青霉素残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。 本标准适用于牛奶中氨青霉素的残留量检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是 否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3制样 3.1样品的制备 取适量新鲜或室温下解冻的冷冻空白或供试牛奶。 3.2样品的保存 -20℃以下冰箱中贮存备用。 4测定方法 4.1方法提要或原理 试样先经三氯乙酸溶液沉淀蛋白，上清液中的氨青霉素与甲醛在酸性条件下,加热生成2-羟基-3- 苯基-6-甲基吡嗪（氨青霉素荧光衍生物）,该衍生物用带有荧光检测器的高效液相色谱在激发波长 （Eα）346nm、发射波长（Em）422nm条件下测定，外标法定量。 4.2试剂和材料 以下所用的试剂,除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的二级水。 4.2.1氨苄青霉素标准品 含氨青霉素(C16Hi8N3NaO4S)不得少于85.0%。 标准信息服务平台 4.2.2乙腈色谱纯 4.2.3三氯乙酸 4.2.4甲醛溶液 4.2.5浓磷酸 4.2.6磷酸二氢钾 4.2.7磷酸盐缓冲液(0.02mol/LpH3.5) 称取2.7218g磷酸二氢钾,置于1000mL容量瓶中,加水900mL使溶解，再用浓磷酸调pH至3.5± 0.05,加水稀释至刻度，摇匀即得。 1