ICS.67.050 X 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 801-2004 生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶 活度的测定方法 Method for determination of alkaline phosphatase activity in raw milk and its products 行业标准信息服务平台 2004-04-16发布 2004-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 801—2004 前言 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准起草单位：农业部乳品质量监督检验测试中心。 本标准主要起草人：王金华、张宗城、张均媚。 行业标准信息服务平台 1 NY/T 801—2004 生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定方法 1范围 本标准规定了生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定方法。 本标准适用于生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定。 本标准方法的检出限为0.02μg苯酚/mL或g。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 碱性磷酸酶活度alkaline phosphatase activity 产品中具活性的碱性磷酸酶数量，它表示为在一定条件下1mL液态乳或1g固态乳制品复原的液 态乳中碱性磷酸酶催化磷酸酚二钠生成苯酚的微克数。 4原理 氯亚胺反应生成蓝色靛酚，在655nm处测定靛酚吸光度，与标准苯酚比较定量。 ALP C,HsPO4Na2 + H2O - +C,H,OH + Nas PO4 CuSO4 C,H,OH + C,H,Cl, ONC1 -- +C18H16N20 5 试剂 所用试剂均为分析纯试剂，实验用水应符合GB6682中一级水的规格或相当纯度的水。 5.1碳酸钠(Na,CO) 5.2碳酸氢钠(NaHCO,) 5.3碳酸盐缓冲液，pH9.64 称取4.689g碳酸钠和3.717g碳酸氢钠，溶于水，定容至100mL。 5.4稀释碳酸盐缓冲液，pH9.64 将碳酸盐缓冲液用水稀释V10.00—V100.0 5.5磷酸酚二钠(C,HsPO4Naz) 5.62,6-二氯醒氯亚胺溶液,3g/L 称取0.030g2,6-二氯醌氯亚胺(O=CsHzClz=NCl),精确至0.0001g，溶人10mL甲醇中,存于 棕色试剂瓶，4℃冰箱中冷藏。测定当天配制。 5.7硫酸铜溶液，2g/L 1