ICS 71.100.70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T 37644—2019 化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的测定 高效液相色谱法 Determination of oxyquinoline and nitroxoline in cosmetics- High performance liquid chromatography 2020-01-01实施 2019-06-04发布 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T37644—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257)归口。 本标准起草单位：苏州世谱检测技术有限公司、扬州完美日用品有限公司、江苏隆力奇生物科技股 份有限公司、上海市日用化学工业研究所广州华鑫检测技术有限公司、广州质量监督检测研究院、上海 中华药业南通有限公司、欧诗漫生物股份有限公司、苏州市食品药品监督管理局、苏州市药品检验检测 研究中心、浙江方圆检测集团股份有限公司、苏州质量检测科学研究院、河北省食品检验研究院、江苏省 产品质量监督检验研究院、江苏省食品药品监督检验研究院、无限极（中国）有限公司。 本标准主要起草人：张征、刘冬虹、童艳、代丹、黄宏霞、周建青、王莉、褚叶果、廖华勇、陈卫、沈敏、 赵永国、张丽华、陆小宇、金家骅、杨安全、章芳、张岩、康薇、范素芳、叶竹洪、濮鑫、梁明、王斌、黄金风、 黄宇峰、寻知庆、洗燕萍、施兵、刘群林、支紫锦、朱燕、侯向昶、吴玉銮、郭新东、卢剑、孙红梅 GB/T37644—2019 引 本标准的被测物质硝羟喹啉是我国《化妆品安全技术规范（2015年版）》规定的禁用物质 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范 （2015年版）》规定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，应进行安全性风险评估，确保 在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害， 目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法 Ⅱ GB/T37644—2019 化妆品中8-羟基喹嘛和硝羟喹嘛的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的高效液相色谱测定方法的原理、试剂和材料、仪 器设备、试验步骤、结果计算、回收率与精密度、允许差等内容。 本标准适用于化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的测定 本标准的方法检出限和定量限：化妆品（蜡基、粉类除外）：8-羟基喹啉和硝羟喹啉的检出限为 1.5mg/kg，定量限为5.0mg/kg；蜡基和粉类化妆品：8-羟基喹啉和硝羟喹啉检出限为3.0mg/kg，定量 限为10.0mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样中的8-羟基喹嘛和硝羟喹啉经溶剂超声提取后，用配有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪 测定，保留时间和光谱图定性，外标法定量。高效液相色谱-质谱/质谱法定性确证。 4试剂和材料 4.1水：GB/T6682规定的一级水。 4.2甲醇：色谱纯。 4.3 乙腈：色谱纯。 4.4 甲酸：色谱纯。 4.5 磷酸：分析纯。 4.6辛烷磺酸钠：分析纯。 4.7标准物质：纯度不小于98%。8-羟基喹啉和硝羟喹啉的中文名称、INCI名称（国际化妆品原料名 称）/英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式参见附录A中的表A.1 4.80.01mol/L辛烷磺酸钠溶液：称取1.08g辛烷磺酸钠（4.6），用水稀释至500mL，用磷酸（4.5）调 节 pH 至 2.5。 4.9磷酸水溶液：移取适量水，用磷酸（4.5）调节pH至2.5。 4.10甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液：甲醇+0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液=7+3（体积比）。 4.11甲酸-乙腈溶液：甲酸十乙=1十99（体积比）。 4.12甲醇-磷酸水溶液：甲醇+磷酸水溶液=7十3（体积比）。 4.13混合标准工作溶液：准确称取标准物质（4.7)10.0mg（精确至0.1mg），用甲醇-0.01mol/L辛烷 存2个月）。分别移取适量标准储备溶液，用甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液（4.10）逐级稀释成质量 1 GB/T37644—2019 浓度分别为0.2μg/mL、0.5μg/mL、2.0μg/mL、10.0μg/mL、50.0μg/mL和100.0μg/mL的系列混合 标准工作溶液（现配现用）。 4.14滤膜：孔径为0.22μm的有机过滤膜。 仪器设备 5 实验室常规设备，及下列仪器： a) 高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器； b) 液相色谱-三重四级杆质谱联用仪； c) 分析天平：感量0.1mg和0.001g； (p 涡旋振荡器； e) 超声波清洗仪：超声功率250W； f) 离心机：转速不低于4000r/min； g) 氮吹仪。 6 试验步骤 6.1 试样处理 6.1.1 化妆品（粉类除外） 称取试样0.1g~0.2g（其中蜡基类0.1g，其他类化妆品0.2g，精确至0.001g）于15mL具塞塑料 离心管中，加甲酸-乙腈溶液（4.11)至5.0mL；蜡基类样品置于70℃水浴中至试样熔融。然后，涡旋振 荡2min，超声提取15min，4000r/min离心3min，取1.0mL上清液40℃氮吹至干，用1.0mL甲 醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液（4.10）复溶，涡旋混匀，过0.45μm滤膜，待测。 6.1.2粉类化妆品 称取试样0.1g（精确至0.001g）于15mL具塞塑料离心管中，加甲醇-磷酸水溶液（4.12）至5mL， 涡旋振荡2min，超声提取15min，4000r/min离心5min，取上层清液过0.45μm滤膜，待测， 6.2 测定条件 高效液相色谱参考条件如下： a) 色谱柱：Ci8，250mm×4.6mm（内径）,5μm，或相当者； b) 流动相：A为甲醇，B为0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液（4.8），梯度洗脱程序见表1； c) 流速：1.0mL/min; d) 柱温：30℃； e) 检测波长：240nm； f) 进样量：20μl。 表 1 梯度洗脱程序 时间/min A/% B/ % 50 0.0 50 6.0 80 20 7.0 90 10 10.0 06 10 2