ICS 71. 100.70 Y 42 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 29675—2013 化妆品中王基苯酚的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of nonylphenol in cosmetics- Liquid chromatography tandem mass spectrometry 2013-09-06发布 2014-02-15实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T29675—2013 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所、中华人民共和国苏州出 入境检验检疫局。 本标准主要起草人：马强、李新实、徐振东、席海为、王星、刘娟、吕庆、连洁、沈敏、康薇。 GB/T29675—2013 引言 本标准的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质，不得作为化妆品生产原料即组分添 加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，则化妆品成品应符合《化妆品卫 生规范》对化妆品的一般要求，即在正常及合理的可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害 目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 Ⅱ GB/T29675—2013 化妆品中王基苯酚的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了化妆品中王基苯酚的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于膏霜、散粉、水剂、唇膏类化妆品中王基苯酚的测定。 本标准对于王基苯酚的检出限为0.1mg/kg，定量限为0.2mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 用甲醇和二氯甲烷混合溶液提取化妆品中的王基苯酚，提取液经离心、固相萃取柱净化后，用液相 色谱-质谱/质谱法进行测定，内标法定量。 4试剂和材料 除非另有规定，所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：质谱级。 4.2王基苯酚标准物质：分子式C15H2O,CAS号25154-52-3，纯度不小于98%，结构式参见附录A的 图A.1. 4.34-n-王基苯酚标准物质：分子式CiH24O，CAS号104-40-5，纯度不小于98%。 4.4王基苯酚标准储备溶液：准确称取适量王基苯酚标准物质（精确至0.1mg），以甲醇（4.1)配制成 浓度为100μg/mL的标准储备溶液，于4℃避光保存，可使用三个月。 4.54-n-王基苯酚内标储备溶液：准确称取适量4-n-王基苯酚标准物质（精确至0.1mg），以甲醇（4.1) 配制成浓度为10μg/mL的内标储备溶液，于4℃避光保存，可使用三个月。 4.6固相萃取柱：基质为N-乙烯吡略烷酮-二乙烯基苯胺，200mg，6mL，或相当者。使用前依次用 6mL甲醇、6mL水活化。 4.7无水乙醇：色谱纯。 4.8二氯甲烷：色谱纯。 4.9氨水。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS)仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 1 GB/T29675—2013 5.2超声波水浴。 5.3分析天平：感量为0.0001g和0.001g。 5.4离心机：转速不低于5000r/min。 5.5行 微孔滤膜：0.45μm，聚四氟乙烯材质。 6测定步骤 6.1样品处理 6.1.1提取 6.1.1.1膏霜类、散粉、水剂类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于16mL具塞玻璃离心管中，加人50μL内标储备溶液（4.5），再 加入10mL甲醇与二氯甲烷混合溶液（8十2，体积比），超声提取30min，以不低于5000r/min离心 15min，取上清液2mL，氮气缓慢吹至近干，再用2mL30%甲醇水溶液涡旋溶解，作为待净化液。 6.1.1.2唇膏类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于16mL具塞玻璃离心管中，加人50μL内标储备溶液（4.5），再 加入10mL无水乙醇与二氯甲烷混合溶液（8十2，体积比），超声提取30min，以不低于5000r/min离 心15min，取上清液2mL，氮气缓慢吹至近干，再用2mL30%甲醇水溶液涡旋溶解，作为待净化液。 6.1.2净化 将6.1.1中的待净化液转移至固相萃取柱（4.6)中。用3mL30%甲醇水溶液洗涤，抽至近干后， 6mL甲醇二氯甲烷混合溶液（8+2，体积比）分两次洗脱。所得洗脱液用氮气缓慢吹至近干，用2mL 甲醇定容，经0.45um微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液。 6.2测定条件 液相色谱-质谱/质谱测定的参考条件如下： 色谱柱：XBridgeCi柱，3.5μm，150mmX2.1mm（内径），或相当者； 流动相：甲醇（A)和0.1%氨水溶液（B)，梯度洗脱：0~2.5min，30%A~90%A；2.5min~ 3 min,90% A~95% A;3min~6 min,95% A;6min~8min,95% A~30% A; c) 流速：0.25mL/min； (P 柱温：30℃； 进样量：5μL； f) 电离方式：电喷雾电离，负离子； g) 毛细管电压：1.5kV； h) 萃取电压：3.0V； i) 射频透镜电压：0.5V； j) 离子源温度：150℃； k) 脱溶剂气：氮气，流速500L/h，温度450℃； 1) 锥孔气：氮气，流速50L/h； m） 扫描方式：多反应监测（MRM），定性离子对、定量离子对、锥孔电压和碰撞气能量见表1。 2