ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 9841—2006 代替GB9841—1988 饲料添加剂 维生素B12（氰钴胺）粉剂 Feed additive- Vitamin Bi2 powder(cyanocobalamin cobione) 2006-02-24发布 2006-07-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T9841—2006 前言 本标准是GB9841一1988《饲料添加剂维生素B12（氰钻胺）粉剂》的修订版。 本标准与GB9841—1988主要技术差异如下： 删去原标准鉴别试验中4.3.2方法； .....5%; —主要成分含量的测定，参考GB/T17819—1999《维生素预混料中维生素B12的测定 高效液 相色谱法》及国内外先进企业标准方法，由紫外分光光度法测定改为高效液相色谱法测定，改 后的方法，可有效消除其他色素杂质干扰，使检测结果更准确可靠； 规定维生素B12标准品应符合中华人民共和国药典； 补充规定砷、铅允许量及检测方法； 干燥失重的测定按照GB/T6435执行。 本标准自实施之日起代替GB9841一1988。 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家标准化管理委员会提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：国家饲料质量监督检验中心（北京）。 本标准主要起草人：赵小阳、索德成、虞哲高、田河山、闫惠文、李兰、刘庆生、李丽蓓、王彤 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB 98411988。 1 GB/T 9841—2006 饲料添加剂 维生素B12（氰钴胺)粉剂 1 范围 本标准规定了饲料添加剂维生素B2（氰钻胺）粉剂产品的要求、试验方法、检验规则及标签、包装、 运输、贮存。 本标准适用于以维生素B（氰钻胺）为原料.加入碳酸钙、玉米淀粉等其他适宜的稀释剂制成的维 生素B12粉剂（其标示量为0.1%、0.5%、1%、.··.5%）。 分子式:CHssCoNi4OuP 相对分子质量：1355.38（1999年国际相对原子质量） 结构式： NH,COCH,CH2 CI laHC Ch,Conh? NH.COCH- CH,CH,CONH; H.C- CN H,C CH: H- CH CH: NHCOCH2 CH: IIC CH, CH,CH,CONH -I1 QHOH .0 CHCHCONHCH-C-O- 0- CH -CH,OH 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6435饲料水分的测定方法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB10648饲料标签 GB/T13080—2004 饲料中铅的测定原子吸收光谱法 GB/T17819一1999维生素预混料中维生素B12的测定高效液相色谱法 中华人民共和国药典 3要求 3.1外观 本品为浅红色至棕色细微粉未，具有吸湿性， 1 GB/T9841—2006 3.2技术指标 技术指标应符合表1规定。 表1技术指标 指标名称 指标 含量（以CHaCoN.O,P计）/[（是标示量的）%] 90~130 砷/(mg/kg) 3. 0 铅/(mg/kg) 10.0 以玉米淀粉等为稀释剂 12.0 干燥失重/（%） 以碳酸钙为稀释剂 5. 0 粒度 全部通过0.25mm孔径标准筛 4试验方法 除特殊说明外，所用试剂均为优级纯，水为蒸馏水，色谱用水符合GB/T6682中一级用水规定，标 准溶液和杂质溶液的制备应符合GB/T602和GB/T603。 4.1试剂和溶液 4.1.125%乙醇溶液（体积分数）。 4.1.2甲醇：色谱纯。 4.1.3冰乙酸。 4.1.41-已烷磺酸钠：色谱级 4.1.5维生素B12标准品：符合中华人民共和国药典。 4.1.6维生素Bi2标准贮备溶液：称取约0.1g（精确至0.0002g）维生素Bi2标准品（4.1.5）,置于 100mL棕色容量瓶中，加适量25%乙醇溶液使其溶解，并稀释定容至刻度，摇匀。该标准储备液每毫升 含维生素 Bi21 mg。 4.1.7维生素Biz标准工作液：准确吸取维生素Bi2标准储备液（4.1.6)1.00mL于100mL棕色容量 瓶中，用水稀释定容至刻度，摇匀。该标准工作液每毫升含维生素B1210ug。 维生素B标准工作液的浓度按下述方法测定和计算： 以水为空白溶液，用紫外分光光度计测定维生素Bi2标准工作液在361nm处的最大吸收度，维生 素Bi2标准工作液的浓度X以微克每毫升（ug/mL）表示，按式（1）计算： SAC 207 ......(1) 式中： A——维生素Blz标准工作液在361nm波长处测得的吸收度； 207——维生素B12标准百分吸收系数（El=207)； 10000— -维生素B12标准工作液浓度单位换算系数。 4.2仪器和设备 实验室常用设备以及以下仪器和设备。 4.2.1超声波水浴。 4.2.2超纯水装置。 4.2.3紫外分光光度计。 4.2.4石英比色皿（1cm）。 4.2.5高效液相色谱仪，带紫外可调波长检测器（或二极管矩阵检测器）。 4.2.6原子吸收分光光度计。 2 GB/T9841—2006 4.3鉴别试验 注意：以下操作过程，需在避光条件下进行。 取试样溶液（4.4.2.1），用分光光度计测定，以1cm石英比色皿在300nm～600nm波长范围内测 定试样溶液的吸收光谱，应在361nm土1nm、550nm士2nm的波长处有最大吸收峰。 4.4维生素B12含量的测定 4.4.1原理 试样中维生素B12经水提取后，注入反相色谱柱上，与流动相中离子对试剂形成离子偶化合物，用流 动相洗脱分离，外标法计算维生素B12的含量。 4.4.2分析步骤 4.4.2.1试液的制备 根据产品含量（参考附录A），称取试样约0.1g~1g（精确至0.0002g)，置于100mL棕色容量瓶 中，加约60mL水，在超声波水浴中超声提取15min，冷却至室温，用水定容至刻度，混匀，过滤，滤液过 0.45μm滤膜，供高效液相色谱仪分析。 4.4.2.2色谱条件 固定相：Cls柱：内径4.6mm，长150mm，粒度5μm。 流动相：每升水溶液中含300mL的甲醇（4.1.2）、1g的已烷磺酸钠（4.1.4）和10mL的冰乙酸 （4.1.3），过滤，超声脱气。 流速：0.5mL/min。 检测器：紫外可调波长检测器（或二极管矩阵检测器），检测波长361nm。 进样量：20μL。 4.4.2.3定量测定 样溶液（4.4.2.1），得到色谱峰面积响应值，用外标法定量。 也可采用GB/T178191999中6.2的方法测定维生素B12的含量。 4.4.3结果计算 4.4.3.1试样中维生素Bi2（C63HssCoN4OP）含量X，以质量分数（%）表示，按式（2)计算： X=4 ....( 2 ) PXm 式中： P—试液（4.4.2.1)峰面积； -维生素Bi2标准工作液（4.1.7)浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)； 100———试液（4.4.2.1)稀释倍数； Pst 维生素B12标准工作液（4.1.7)峰面积； m 一试样质量，单位为克（g）。 4.4.3.2试样中维生素B12占标示量的质量分数（%）以X，表示，按式（3)计算： XI (3) K 式中： K一产品中维生素B12标示量。 平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。 4.4.4重复性 同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差应不大于5% 4.5砷的测定 按照中华人民共和国药典砷的测定法 第一法（古蔡氏法）测定，准确称取试样1g（准确至 3