ICS 71.100.70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T 37545—2019 化妆品中38种准用着色剂的测定 高效液相色谱法 Determination of 38 kinds of permitted colorants in cosmetics- High performance liquid chromatography 2020-01-01实施 2019-06-04发布 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T37545—2019 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：大连市食品检验所、大连市产品质量检测研究院、上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人：毛希琴、李春玲、任国杰、李鹏、勇艳华、董广彬、李肖斐、顾鑫荣、曲宝成 边海涛。 GB/T37545—2019 引言 本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及专利号为ZL201410539619.X《化妆品 中38种限用着色剂同时检测的方法》专利的使用。 本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场 该专利持有人已向本文件的发布机构保证，他同意在公平、合理、无歧视基础上，免费许可任何组织 可以通过以下联系方式获得： 专利持有人姓名：大连市食品检验所。 地址：大连市开发区铁山东路102号 请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专 利的责任。 GB/T37545—2019 化妆品中38种准用着色剂的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中38种准用着色剂的高效液相色谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、 试样制备、分析步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容。 的定量测定 本标准方法目标物的检出限和定量限参见附录A中的表A,1。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 利用四氢呋哺-甲醇-水体系同时提取化妆品中的水溶性和油溶性着色剂，离心去除基质后，提取液 经氮吹浓缩后用甲醇复溶并稀释，用反相高效液相色谱分离，标准曲线外标法定量。对经高效液相色谱 法确认为超范围或超限量使用了准用着色剂的化妆品样品，必要时需进行质谱确证 4 试剂和材料 除非另有说明，所用水为GB/T6682中规定的一级水， 4.1标准物质：纯度大于90%。38种准用着色剂的中文名称、着色剂索引通用名、CI号、CAS号、分子 式、结构式、相对分子质量参见附录B中的表B.1。 4.2甲醇：分析纯。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 甲酸：色谱纯。 4.5 四氢喃：分析纯。 4.6 二甲基亚砜：分析纯。 乙：色谱纯。 4.7 4.8 醋酸铵：分析纯。 4.9抗坏血酸钠：分析纯。 4.10标准溶液稀释液：准确称取抗坏血酸钠（4.9)0.1g，加入5mL水溶解后，继续加入5mL四氢呋 喃后，用甲醇（4.3）容至100mL。（需现用现配） 4.110.5mol/L醋酸铵水溶液（含有0.5%抗坏血酸钠）：准确称取醋酸铵（4.8）3.85g和抗坏血酸钠 （4.9）0.5g至容量瓶中，用水溶解后定容至100mL。 4.120.03mo1/L醋酸铵水溶液（含0.075%甲酸）：准确称取醋酸铵（4.8)2.31g，先加水溶解，然后继续 1 GB/T37545—2019 加入准确移取的750μL甲酸（4.4），最后加水定容至1L，震荡混匀后备用。 4.13标准储备溶液A：分别准确称取各标准物质（食品红10、酸性紫43、酸性橙10、酸性蓝62、酸性黄 5共15种）5mg（精确至0.01mg）于棕色容量瓶中，用水溶解后定容至10mL，配制成质量浓度为 500ug/mL的标准储备液，于4℃～6℃条件下避光保存，保存期为3个月。 4.14标准储备溶液B：分别准确称取各标准物质（酸性红88、溴甲酚绿、碱性紫2、酸性橙7、酸性红50、 酸性紫9、酸性绿9、酸性黑1、酸性红52、酸性蓝1、酸性黄121、分散黄16、碱性蓝26、酸性红98、溶剂黄 29、酸性紫50、酸性绿22共17种）5mg（精确至0.01mg）于棕色容量瓶中，用甲醇（4.3）溶解后定容至 10mL，配制成质量浓度为500μg/mL的标准储备液，于4℃6℃条件下避光保存，保存期为3个月。 4.15标准储备溶液C：分别准确称取各标准物质（溶剂红3、溶剂黄33和溶剂绿3共3种）5mg（精确 至0.01mg）于棕色容量瓶中，用四氢呋溶解后定容至10mL，配制成质量浓度为500μg/mL的标准 储备液，于4℃～6℃条件下避光保存，保存期为3个月。 4.16标准储备溶液D：准确称取标准物质（颜料红4共1种）5mg（精确至0.01mg）于棕色容量瓶中， 用四氢呋喃溶解后定容至10mL，配制成质量浓度为500μg/mL的标准储备液，于4℃～6℃条件下 避光保存，保存期为3个月。 4.17标准储备溶液E：分别准确称取各标准物质（颜料红49和颜料红64共2种）5mg（精确至 0.01mg)于棕色容量瓶中，用二甲基亚砜溶解后定容至10mL，配制成质量浓度为500μg/mL的标准 储备液，于4℃～6℃条件下避光保存，保存期为3个月。 4.180.45μm微孔聚四氟乙烯（PTFE）滤膜针式过滤器。 5仪器设备 5.1高效液相色谱-二极管阵列检测器。 5.2高效液相色谱串联四级杆质谱仪，配置电喷雾电离源（ESI)（定性确证时使用）。 5.3分析天平：感量0.001g；0.00001g。 5.4 涡旋混合器。 5.5超声波清洗器：功率不低于300W。 5.6离心机：转速不小于5000r/min，离心试管容量10mL。 5.7 移液枪或移液器。 6试样制备 准确称取0.2g样品（精确至0.001g）于10mL具塞刻度离心管中，首先加人6mL四氢呋喃（4.5） 涡旋并超声10min，使样品分散并提取目标物（若遇唇膏样品无法分散的情况，可用80℃水浴适当加 热1min~2min即可分散）。继续向离心管中依次加人2mL甲醇（4.2）和2mL醋酸铵水溶液（4.11）， 涡旋混合均匀，超声提取10min，然后于5000r/min离心10min。准确移取上层提取液2mL于5mL 刻度塑料试管中，氮吹浓缩至约0.5mL，然后用甲醇（4.2）稀释并定容至4mL，超声30min后，经微孔 聚四氟乙烯（PTFE）滤膜（4.18)过滤转人进样瓶中待测。 7分析步骤 7.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： a）色谱柱：ZORBAXSB-Aq.3.5μm，3.0mmX150mm（或相当者）； 2 SAC