ICS 87.040 G 50 中华人民共和国国家标准 GB/T 37363.1—2019 涂料中生物杀伤剂含量的测定 第1部分：异噻唑啉酮含量的测定 Determination of biocides content of coating materials- Part 1:Determination of isothiazolinones content 2019-03-25发布 2019-07-01实施 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T37363.1—2019 前言 GB/T37363《涂料中生物杀伤剂含量的测定》分为以下几个部分： 第1部分：异噻唑啉酮含量的测定； 一第2部分：敌草隆含量的测定； 本部分为GB/T37363的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本部分由中国石油和化学工业联合会提出。 本部分由全国涂料和颜料标准化技术委员会（SAC/TC5)归口。 本部分起草单位：中海油常州涂料化工研究院有限公司、天津海关工业产品安全技术中心、佛山市 顺德区巴德富实业有限公司、中航百慕新材料技术工程股份有限公司、广东产品质量监督检验研究院、 陶氏化学（中国）投资有限公司、龙沙（中国）投资有限公司、托尔专用化学品（镇江）有限公司、万华化学 集团股份有限公司、深圳市广田环保涂料有限公司、河北晨阳工贸集团有限公司、中华制漆（深圳）有限 公司、广东嘉宝莉科技材料有限公司、常州光辉新材料研究所有限公司、广东省珠海市质量计量监督检 徐新祥、胡中源、王智、叶彩平、赵绍洪、李军、王承茜、彭永森、袁骏 1 GB/T 37363.1—2019 涂料中生物杀伤剂含量的测定 第1部分：异噻唑啉酮含量的测定 警示一一使用本部分的人员应有正规实验室工作的实践经验。本部分并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。 1范围 GB/T37363的本部分规定了采用液相色谱-质谱/质谱联用法和液相色谱法测定涂料中异噻唑啉 酮类生物杀伤剂含量的原理、试剂和材料、仪器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、检出限、精密度和 试验报告。 本部分适用于涂料中异噻唑啉酮类生物杀伤剂含量的测定。漆膜及涂料用原材料中异噻唑啉酮类 生物杀伤剂含量的测定也可参照本部分。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T3186色漆、清漆和色漆与清漆用原材料取样 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法 GB/T12806一2011实验室玻璃仪器单标线容量瓶 GB/T12807—1991实验室玻璃仪器分度吸量管 GB/T12808—2015实验室玻璃仪器单标线吸量管 3原理 液相色谱-质谱/质谱联用法：以甲醇为提取溶剂，用超声提取和离心分离相结合的方法提取试样中 的异噻唑嘛酮类生物杀伤剂，用液相色谱-质谱/质谱联用仪（LC-MS/MS）进行测定，以保留时间和选择 离子定性，外标法定量。 液相色谱法：以甲醇为提取溶剂，用超声提取和离心分离相结合的方法提取试样中的异噻唑啉酮类 生物杀伤剂，用液相色谱仪（LC）检测，以保留时间定性，外标法定量 注1：也可选择其他经确认的合适溶剂作为提取溶剂。 注2：本部分的液相色谱包括高效液相色谱（HPLC）、超高效液相色谱（UPLC)等。 4试剂和材料 除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯及以上纯度的试剂和符合GB/T6682一2008要求的 一级水。 4.1MI,CMI,BITOIT、DCOIT等异噻唑啉酮校准化合物。 注：CMI也可以使用含量已知的溶液 4.2甲醇：色谱纯。 1 GB/T37363.1—2019 4.3 3乙酸铵：色谱纯。 4.4甲酸：色谱纯。 4.5微孔滤膜：孔径0.22μm。 4.6混合标准储备溶液：约200μg/mL，称取每种异噻唑啉酮校准化合物（4.1)约0.02g精确到0.1mg 置于100mL容量瓶（5.6）中，用甲醇（4.2)稀释至刻度。该标准储备溶液在4℃以下避光保存，有效期 为1个月。 注1：也可直接使用已知浓度的有证异噻唑啉酮混合标准溶液。 注2：也可根据每种异噻唑啉酮校准化合物浓度适当调节每种异噻唑啉酮校准化合物称样量。 注3：也可根据需要选择异噻唑啉酮校准化合物的种类配制混合标准储备溶液。 7不锈钢金属筛：孔径0.5mm。 4.7 5仪器设备 5.1 高速离心机：转速12000r/min以上，可控温。 5.2超声波提取仪：功率≥500W。 5.3天平：精度0.1mg。 5.4液相色谱-质谱/质谱联用仪：配置反相液相色谱柱，能分离本部分中规定的异噻唑啉酮化合物 5.5 5液相色谱仪：配置紫外检测器或者二极管阵列检测器。配置反相液相色谱柱，能分离本部分中规 定的异噻唑啉酮化合物。 5.6容量瓶：适合的规格，GB/T12806一2011A级。 5.7分度吸量管：适合的规格，GB/T12807—1991A级。 注：也可使用精度满足要求的其他移液设备，如活塞式移液枪等。 5.8 3单标线吸量管：适合的规格，GB/T12808—2015A级。 注：也可使用精度满足要求的其他移液设备，如活塞式移液枪等。 6样品 按GB/T3186的规定取样，也可按商定方法取样，取样量根据检验需要确定。 注：若样品储存条件不适当，可能加速部分异唑嘛酮类生物杀伤剂的损失。为了尽量防止这些反应发生，样品可 储存在低温、暗处。在打开容器之前将样品调节至室温 7试验步骤 7.1液相色谱-质谱/质谱联用法（LC-MS/MS法） 7.1.1平行试验 平行做两份试验。 7.1.2样品前处理 将样品搅拌均匀[如样品为固态，可在室温下用粉碎设备将样品粉碎，并用孔径0.5mm不锈钢金 属筛（4.7）过筛］，称取约2.5g试样（精确至0.1mg）于25mL容量瓶（5.6）中，记录试样质量m，用甲醇 （4.2）稀释至刻度，充分振摇使试样得到最大程度分散，制成试样溶液，记录定容体积V。用超声波提取 仪（5.2）超声提取20min后，移取上述溶液约7mL于离心管中（也可根据实际情况调整进行离心的溶 2 GB/T37363.1—2019 果不佳，不能有效分层，可适当增加转速或增加离心时间。 当选择其他溶剂作为提取溶剂时，用单标线吸量管（5.8）移取1mL清液A于10mL容量瓶（5.6） 中，用甲醇（4.2）定容至刻度，记为溶液B。 取适量清液A或溶液B，用0.22um微孔滤膜（4.5）过滤，保留滤液C，用于提取溶液的测定（7.1.6）。 7.1.3空白试验 空白试验应与测试平行进行，并采用相同的试验步骤，取相同量的所有试剂，但不加样品。 7.1.4LC-MS/MS测试条件 根据所用LC-MS/MS的性能及试样的实际情况选择适宜的测试条件。 由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不能给出色谱和质谱分析的普适参数，列于附录A中A,1 的参数已被证明对测试是适用的。 7.1.5绘制标准工作曲线 7.1.5.1配制标准工作溶液 配制不加标工作溶液。采用逐级稀释的方法，用分度吸量管（5.7）或单标线吸量管（5.8）移取适量 的混合标准储备溶液（4.6）于适合的容量瓶（5.6）中，用甲醇（4.2）稀释成适用浓度的混合标准工作溶液。 7.1.5.2绘制工作曲线 相对偏差应不大于5%。 以峰面积为纵坐标（扣除不加标工作溶液中异噻唑啉酮的峰面积），相应浓度为横坐标绘制标准工 作曲线。标准工作曲线至少包括五个标准工作溶液。标准工作曲线的线性相关系数R应大于0.995， 否则应重新绘制新的标准工作曲线。 7.1.6提取溶液的测定 按7.1.4的测试条件测定滤液C，记录LC-MS/MS色谱图和选择离子质谱图。以保留时间和选择 离子定性，对定量离子的峰面积（扣除空白试验中相应异噻唑啉酮的峰面积）定量，通过标准工作曲线得 出滤液C中每种异噻唑啉酮浓度β;。如滤液C中异噻唑啉酮的含量超出标准工作曲线范围，可以适当 稀释后上机分析。 7.2液相色谱法 7.2.1平行试验 平行做两份试验。 7.2.2样品前处理 属筛（4.7）过筛」，称取约2.5g试样（精确至0.1mg）于25mL容量瓶（5.6）中，记录试样质量m，用甲醇 （4.2）稀释至刻度，充分振摇使试样得到最大程度分散，制成试样溶液，记录定容体积V。用超声波提取 仪（5.2）超声提取20min后，移取上述溶液约7mL于离心管中（也可根据实际情况调整进行离心的溶 果不佳，不能有效分层，可适当增加转速或增加离心时间。 3