ICS 65.020.20 B 25 中华人民共和国国家标准 GB/T 37068—2018 牧草抗性鉴定技术规范 耐酸性测定 Technical specification for forage stress tolerance test- Acidtolerancetest 2019-07-01实施 2018-12-28发布 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 37068—2018 前言 本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出， 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274)归口。 本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、全国畜牧总站。 本标准主要起草人：李向林、赵小丽、全宗永、何峰、万里强、王瑜、苗丽宏 GB/T 37068—2018 牧草抗性鉴定技术规范 耐酸性测定 1范围 本标准规定了牧草抗性鉴定中耐酸性测定的技术规范 本标准适用于不同牧草和同一牧草不同品种间的耐酸性评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单适用于本文件。 GB/T 2930.4 牧草种子检验规程发芽试验 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 耐酸性 Eacid tolerance 牧草对不同酸性条件的耐受能力。 3.2 种子萌发期 seed germination stage 从播种到幼苗真叶完全展开的时期。 3.3 月 shoot stage 苗期 从幼苗真叶完全展开到出现分枝或分的时期 3.4 营养生长期 vegetativegrowth stage 从苗期到禾本科草抽穗期或豆科草现蕾期前的时期。 4耐酸性测定 4.1种子萌发期 4.1.1样品准备 每份待测牧草，挑选饱满健康种子1600粒。 4.1.2 酸胁迫处理 设置3个酸胁迫梯度，将稀盐酸溶液分别调至pH值为4.0、4.5和5.0，加人发芽床，每个酸度处理 4次重复，每个重复100粒种子，其他参数按照GB/T2930.4的方法进行发芽试验，每2天校正一次 pH值。 1 GB/T37068—2018 4.1.3对照处理 对照处理设4个重复，每个重复100粒种子，按照GB/T2930.4的方法进行发芽试验。 4.1.4种子发芽率计算 每个酸胁迫梯度处理分别进行计算。种子发芽率按式（1）、式（2）、式（3）计算： XGa G,= X100 (1) XTa Gck ..(2) XTck Ga X 100 ....(3) Gck 式中： Ga 酸胁迫培养的发芽率，%； XGa 酸胁迫培养4次重复萌发种子数的平均值； XTa 酸迫培养4次重复种子总数的平均值； Gck 对照培养的发芽率，%； XGck— 一对照培养4次重复萌发种子数的平均值； Xtck——对照培养4次重复种子总数的平均值； RG, 相对发芽率，即每个处理的实测发芽率与对照发芽率的百分比，% 4.2苗期 4.2.1育苗 取饱满健康的种子，每个处理4个重复，每个重复100粒，按照GB/T2930.4的方法发芽后，用海绵 条将幼苗固定在带有小孔的塑料板中，置于含有Hoagland营养液的方形培养盆中，pH调至7.0，每盆 留苗30株，置于人工气候箱中培养，光照强度为25001x，光照周期为16h/8h（光照/黑暗），温度设置 为25℃/20℃（光照/黑暗），培养盆内安置加氧泵，长出叶片后开始通气，每天保持24h通气，每2天校 正一次pH值。 4.2.2酸胁迫处理 幼苗长至三叶时，进行苗期酸胁迫处理。用1mol/LHCl和NaOH调节培养液的酸碱度，使三个 胁迫处理的pH值分别稳定在4.0、4.5和5.0。每个处理4个重复。酸胁迫处理20d后，将幼苗移到 pH为7.0的正常培养液中培养4d,调查存活苗数，以叶片转呈鲜绿色者为存活。 4.2.3酸胁迫存活率计算 每个酸胁迫梯度处理分别进行计算。酸胁迫存活率按式（4)计算： X S X 100 .（4) Xst 式中： S 酸胁迫存活率，%； Xa 酸胁迫后4次重复存活苗数的平均值； 酸胁迫前4次重复总苗数的平均值。 2 GB/T370682018 4.3 营养生长期 4.3.1育苗 每盆留苗20株，育苗方法同4.2.1。 4.3.2 酸胁迫处理 植株分或分枝达到3个时，进行酸胁迫处理。用1mol/LHCI和NaOH调节培养液的酸碱度 使其pH值分别稳定在4.0、4.5和5.0。酸胁迫20d后，将幼苗移到pH为7.0的正常培养液中培养 4d，调查存活苗数，以叶片转呈鲜绿色者为存活。 4.3.3 酸胁迫存活率计算 同4.2.3。 5 耐酸性评价 根据测试结果，将牧草耐酸性分为四级，即极强（HR，highlyresistant）、强（R，resistant）、中（MR， moderatelyresistant）和弱（S，susceptible）。种子萌发期、苗期、营养生长期的耐酸性等级分别见表1、 表2和表3。按照pH值由高到低的次序进行评价，以相对发芽率或存活率数值达到要求所对应的最高 pH为准，进行耐酸性等级划分。 表1 牧草萌发期耐酸性评价 pH 相对发芽率RG./% 耐酸性等级 5.0 0S> 弱(S) 4.5 09> 中等(MR) 4.0 09> 强(R) 4.0 ≥50 极强（HR) 表 2 牧草苗期耐酸性评价 pH 存活率S./% 耐酸性等级 5.0 09> 弱(S) 4,5 09> 中等(MR) 4.0 强(R) 4.0 ≥50 极强(HR) 表3 牧草营养生长期耐酸性评价 pH 存活率S./% 耐酸性等级 5.0 <50 弱(S) 4.5 0s> 中等(MR) 4.0 09> 强(R) 4.0 >50 极强(HR)