ICS 71.040.20 F 54 中华人民共和国国家标准 GB/T 16699—1996 放射免疫分析试剂盒的基本要求 Principal requirements for radioimmunoassay kits 1996-12-19发布 1997-12-01实施 国家技术监督局 发布 GB/T16699-1996 前 創言 放射免疫分析及其相关技术在我国已广泛用来分析人体体液中各种微量物质，成为临床诊断和生 物医学研究的重要工具。目前我国有20多个生产厂家生产和销售各种放射免疫分析试剂盒，一些医院 的实验室也在组装自已实验室用的某些试剂盒，并非正式地向其他单位推广使用。诚然，制备各种放射 免疫分析试剂盒，这是一件好事，问题在于许多放射免疫试剂盒不能得到可靠的、可以比较的结果。早在 80年代，许多国家和国际组织就在着手制定免疫分析试剂盒的标准，根据我国的实际情况，制定放射免 疫分析试剂盒的基本要求和标准，对于规范和提高放射免疫分析试剂盒的质量，同时使我国放射免疫分 析试剂盒按国际上有关的规范组织生产就显得十分必要了。 本标准根据我国多年来生产放射免疫分析试剂盒的实际情况以及在这一领域标准化方面的工作。 编写时既考虑我国实际，同时又尽可能和国际接轨。 本标准由中国核工业总公司提出。 本标准起草单位：中国原子能科学研究院同位素所。 本标准起草人：贺佑丰。 1 中华人民共和国国家标准 放射免疫分析试剂盒的基本要求 GB/T16699—1996 Principal requirements for radioimmunoassay kits 1 范围 本标准规定了放射免疫分析试剂盒的基本要求。本标准适用于放射免疫分析试剂盒。其基本原则 也适用于非放射性同位素标记的免疫分析试剂盒。 2 总则 对放射免疫分析试剂盒及其组分建立一套标准，以使国家质检部门和生产厂家用来统一规范和管 理试剂盒及其组分的生产和销售是非常必要的。 测定方法的特异性是唯一确定待测物类型和种类的能力，它取决于待测物特定分子结构和待测样 品的性质。对于每种分析物的测定方法，需要有专一特异性的参考品，即合适的国际参考品或国家的参 考品。 测定所得到原始数据用不同的数据处理方法，往往得到不同的结果。生产厂家应向用户推荐数据处 理方法，最好是世界卫生组织（WHO）已推荐的数据处理程序， 使用放射免疫分析试剂盒时操作人员所受到的辐射损伤是可以忽略的，但仍应严格遵守操作开放 性放射性物质的有关规定。 3放射免疫分析试剂盒主要组分及其要求 放射免疫分析试剂盒系指一整套试剂和材料，用于检测分析物并可达到一定的分析精确度。 冲液等。使用固相分离技术时，抗体或抗原往往结合在固相支持物上。有些试剂盒还配有其他材料，如 滤膜、取血纸片等。 试剂盒应严格按照其说明书的规定使用。试剂盒的性能和技术指标是由试剂盒的内在质量、实验室 条件和操作者水平所决定的。试剂盒的每一组分性能是可以进行质控的，但每一组分最终的可适用性只 有当它与所有其他组分一起并把试剂盒当作整体来使用时才能得以确定。 3.1标记物 标记物可以是标记抗原或标记抗体。标记抗原应由免疫活性好的抗原或纯度相应的化学衍生物来 制备；标记抗体的原料可以是纯化的免疫球蛋白部分或杂交瘤技术生产的单克隆抗体。 标记物是放射免疫分析试剂盒中十分重要而且容易变化的组分。标记物应有严格的质量控制指标： 放射化学纯度~般应大于90%。 标记物的放射性比活度一般根据试剂盒所采用的方法学、待测分析物的测量范围和方法的灵敏度 应有适当的要求。 标记抗原的免疫反应性用过量抗体结合来检定，一般应大于80%；标记抗体的免疫反应性可以选 国家技术监督局1996-12-19批准 1997-12-01实施 2 GB/T 16699—1996 用适当的方法检定。 3.2抗体 抗体是试剂盒的重要组成部分。 为了制备特异性好的多克隆抗体，应尽可能使用纯度高的免疫原，同时选用对相应免疫原有较强免 疫应答的动物和合适的免疫程序。 试剂盒中使用的抗体，应该测定其滴度、交叉反应性和亲和性，并符合试剂盒的技术指标。 在杂交瘤技术中，对免疫原的纯度要求不像制备多克隆抗体时那样苛刻，使用纯度不高的免疫原， 也可以制备出特异性专一的单克隆抗体。单克隆抗体的优点在于特异性好，但其亲和性往往不及多克隆 抗体。 3.3分离剂 分离剂应使结合部分和游离部分尽可能完全分离，尽可能不受温度、时间、pH和离子强度等因素 的影响，非特异结合低，操作相对简便。 3.4质控血清 质控血清是用于检定实验室内部一系列试验的内质量控制，或分发到不同地区检定实验室之间的 外质量控制所用的血清。 质控血清含高、中、低不同浓度内源性待测分析物的样品。 3.5标准品 试剂盒中的标准品应含有与待测物相同分子的物质或者在该测定体系中，此标准品在其分析物测 量浓度范围内，显示出与分析物呈平行响应关系的物质。 每一批试剂盒的标准品，应经严格鉴定并与国际的或国家的参考标准校准，校准时，应使用含待测 分析物的生物体液（如血清）来稀释。试剂盒中标准品的标定，应根据若干次单独测定的结果。 试剂盒中的标准品应用加速降解或其他合适的方法来检验其稳定性，以保证在其运输和使用环境 中是稳定的。 4放射免疫分析试剂盒的标签 试剂盒的所有组分容器及外包装都应有标签，其内容符合有关规定。 4.1容器标签 包括标准的各组分容器上的标签，内容至少应包括下述几个方面： a）名称 一般应使用国际非专利商品名，有时也可以使用专利商品名。 b）生产厂家名称 指已注册或持有许可证的生产厂家中文全名。 c）产品批号 d）组分的浓度 表示浓度时，应用SI单位。 e）保存条件和失效期 保存条件和失效期一并说明。 f）抗体的标签应注明是由哪种动物产生的，使用单克隆抗体或基因工程产品也应加以说明。 g）注意事项 如果某一组分对人有危害必须注明。注明“放射性物质”，并用国际上公认的符号标明。 4.2外包装上的标签 3 GB/T16699-1996 外包装上的标签除容器标签上的有关内容如生产厂家、名称外，至少还要有下述内容： a）注册商标； b）产品代码； c）批准文号； d）每种试剂盒的规格、组分、组分的数量； e）注明运输和保存条件。 5试剂盒说明书的要求 试剂盒的使用规程，说明书还要包括下述内容： 5.1试剂盒的用途 指出试剂盒的用途，并明确指出供体外诊断用。 5.2方法的原理 简单扼要地描述方法的原理和分离方法并提供参考文献。 5.3试验的解释和描述 说明待测分析物的生理特征及测定的临床意义，并附有临床应用的参考文献。 5.4试剂盒中提供的试剂和材料 其他试剂盒，必须清楚地加以说明。试剂如需要稀释方可使用时，必须说明稀释方法。 5.5试剂盒中未提供的试剂、材料和仪器 为了按说明书要求进行试验，需要用户自已准备的试剂、材料和仪器的名称、性能和规格。 5.6样品收集和保存 a）特别注意样品的收集，包括收集样品的特殊要求，如肾素的测定，何时取样以及患者的体位。 b）添加剂，指保持样品不变质而加入的防腐剂。 c）已知干扰剂，特殊的抗凝剂。 d）样品的保存、运输和管理。 5.7分析程序 试验程序的描述必须准确，而且易于理解。使用者必须按此程序进行试验，如加样、温育、离心、洗涤 和测量，每一步都描述得准确无误。离心的条件，仅给出转速是不够的，必须说明离心力（g）的大小 5.8结果计算 生产厂家推荐数据处理的方法，并给出计算实例，包括剂量-响应曲线。 5.9试剂盒的操作特性和技术指标 生产厂家提供试剂盒的性能和技术指标：如非特异结合、灵敏度及其计算方法、特异性、测量范围、 精密度和准确性，以及正常值和病理值的参考值。 5.10试剂盒的局限性 5.11生产厂家名称、详细地址及电话和传真 5.12批准的生产文号 5.13注意事项 说明书上注明使用该试剂盒时的注意事项，如遵守放射性物质的操作规定、防止微生物污染、化学 毒性以及操作中其他的注意事项。 5.14参考文献 6评价放射免疫分析试剂盒性能的准则 6.1试剂盒随机误差评估 4