ICS 65.120 CCS B 46 中华人民共和国国家标准 GB/T20806—2022 代替GB/T20806—2006 饲料中中性洗涤纤维（NDF)的测定 Determination of neutral detergent fiber(NDF)in feeds 2023-07-01实施 2022-12-30发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T20806—2022 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： a) 更改了样品细度要求（见4.4，2006年版的7.2）； 增加了预先脱脂步骤（见4.5.3）； 增加了消煮用"0.5g无水亚硫酸钠”（见4.5.4）； d) 增加了助滤剂（见4.5.5）； 更改了试验数据处理（见4.6，2006年版的8.1）； 增加了滤袋法（见第5章）； f) g） 增加了热稳定α-淀粉酶的校准和稀释（见附录A）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)提出并归口。 本文件起草单位：四川威尔检测技术股份有限公司、山东省畜产品质量安全中心、青海省农业农 村厅。 本文件主要起草人：张凤秤、张芸、张茹、宋军、孙延军、杜亚欣、宋涛、张玮、李斌、李永亮、张小超， 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： 2006年首次发布为GB/T20806—2006； 一本次为第一次修订。 GB/T20806—2022 饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定 1范围 本文件描述了饲料中中性洗涤纤维（NDF）测定的璃法和滤袋法： 本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和饲料原料中中性洗涤纤维（NDF）的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T6682 2分析实验室用水规格和试验方法 GB/T20195动物饲料试样的制备 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4埚法（仲裁法） 4.1原理 用热稳定&-淀粉酶和中性洗涤溶液消化、洗涤，除去试样中容易消化的蛋白质、脂类、糖、淀粉和果 胶后，剩余的为不溶性纤维残渣，主要为植物性原料成分如纤维素、半纤维素和木质素，以及动物产品中 难以消化的含氮物质。 4.2 2试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.2.1水：GB/T6682,三级 4.2.2无水亚硫酸钠（NazSO）。 4.2.3丙酮。 4.2.4盐酸溶液（4mol/L）：量取328mL浓盐酸，用水稀释至1000mL，混匀。 4.2.5热稳定α-淀粉酶溶液：购置热稳定α-淀粉酶。使用前按照附录A对热稳定α-淀粉酶进行校准和 稀释，保证稀释后的2mL热稳定α-淀粉酶溶液可以除去0.5g生玉米粉中的淀粉。稀释后的热稳定α 淀粉酶溶液2℃～8℃保存，有效期5d。 4.2.6中性洗涤溶液：量取500mL水于1000mL烧杯中，加人18.6g乙二胺四乙酸二钠（CioHi N,O.Na2·2H,O）、4.56g无水磷酸氢二钠（NazHPO）和6.81g四硼酸钠（NazB,O，·10HzO），加热 溶解，混匀，置于通风橱中。加入30g十二烷基硫酸钠（C12H2,NaO,S），溶解后加入10mL二缩三乙二 醇（CHO）消除泡沫，加水至约950mL，搅拌均匀，用浓盐酸或氢氧化钠将pH调至6.95~7.05，用水 稀释至1000mL。室温保存 1 GB/T20806—2022 注：如果pH偏离超过0.5，则舍弃该溶液，重新配制。如果溶液出现沉淀，使用前加热至25℃，并重新调节pH至 6.95~7.05。 4.2.7助滤剂：石英砂，粒径125μm~150μm。使用前加入4mol/L盐酸溶液（4.2.4）浸没，煮沸，用水 洗涤至中性，置于马弗炉（4.3.6)中，500℃土20℃灼烧2h，取出，冷却后放入干燥器中备用。 4.3仪器设备 4.3.1分析天平：精度0.01g、0.0001g。 4.3.2回流消煮装置：配有600mL烧杯、独立加热单元和适配600mL烧杯的水冷凝器，或采用按照 4.1原理制造的纤维测定仪。 4.3.3砂芯：孔径40μm~60μm，高型，50mL，或适配纤维测定仪，孔径40μm~100μm，容量 26 mL~30 mL。 注1：新砂芯使用前检查过滤速度，每个砂芯埚装满50mL水（纤维测定仪砂芯为25mL），在不抽真空 间105s)，采用酸性或者碱性清洗液进行清洗。如果清洗后排干时间仍不能满足要求，则舍弃不用。 注2：新砂芯埚使用前洗干净，500℃土20℃灼烧1h。 注3：每次使用后洗干净，500℃土20℃灼烧3h，去除灰分，超声清洗10min，用热水淋洗，室温下用水浸泡至少 30 min。 4.3.4真空抽滤装置：抽滤瓶、真空泵。 4.3.5干燥箱：控温精度土2℃。 4.3.6马弗炉：控温精度土20℃。 4.3.7pH计：精度±0.01。 4.4样品 如果试样水分含量大于15%，应先将试样在低于60℃烘箱中风干，使其水分达到15%以下。按 GB/T20195制备样品，至少200g，粉碎使其全部通过1mm孔径的分析筛，充分混匀，装人密闭容器 中,备用。 4.5试验步骤 4.5.1砂芯埚准备 将洁净的砂芯埚（4.3.3）于105℃土2℃干燥2h，取出，置于干燥器中冷却30min，称量（精确至 0.000 1 g)。 4.5.2称量试样 平行做两份试验。根据试样中中性洗涤纤维的含量，称取试样0.4g～1.0g，精确至0.0001g。试 样脂肪含量超过5%时应预先脱脂，试样置于砂芯璃（4.3.3）中，从4.5.3开始处理；不需要预先脱脂 的，试样置于烧杯（4.3.2）中，从4.5.4开始处理。 4.5.3预先脱脂 将砂芯埚（4.3.3）放在过滤装置上，用丙酮脱脂4次，每次加人50mL丙酮，浸洗试样5min，浸洗 过程中搅拌3次。抽真空除去丙酮。在通风橱中挥发30min，去除残余丙酮，把脱脂后的试样转移至 烧杯（4.3.2）中。使用同一个砂芯埚收集洗涤后的中性洗涤纤维残渣。 2 GB/T20806—2022 4.5.4消煮 向每个烧杯（4.3.2）中加入0.5g无水亚硫酸钠（4.2.2）、50mL中性洗涤溶液（4.2.6），轻摇分散样 品，防止试样回流时黏在底部。加热，5min内煮沸，加入2mL热稳定α-淀粉酶溶液（4.2.5），轻摇，防正 试样黏在底部或烧杯壁上。 保证试样充分翻滚，消煮60min士1min。期间防止在回流烧杯上方产生过多泡沫把试样颗粒附 着在烧杯壁，试样可能有1min～2min产生大量泡沫，不得降低加热温度。加入热稳定α-淀粉酶溶液 5min10min后，根据需要用最少量的中性洗涤溶液（4.2.6）冲洗回流烧杯壁，使样品悬浮在中性洗涤 溶液中，最多冲洗2次。 4.5.5过滤 从加热装置中取下烧杯（4.3.2），让试样颗粒沉降60S。观察试样消煮液，若溶液表面有脂质小球， 或发生乳化现象，表明试样脂肪含量高，应重新称样，从4.5.3开始操作。 称取5g助滤剂（4.2.7），精确至0.0001g，置于砂芯埚中。将搅拌棒放在砂芯上，加入 40mL沸水浸洗60s，用真空抽干后，立即从回流烧杯中倒入40mL消煮液，保持回流烧杯在砂芯 上方持续倒人消煮液，用最小真空度抽去剩余的溶液，并在残渣变干前关闭真空。 注：过度抽真空和过度干燥会导致试样残渣堵塞砂芯，以至于无法清洗。 用搅拌棒刮取回流烧杯底部和烧杯壁的颗粒，用少量沸水将所有未转移的试样颗粒并入砂芯埚 中，在砂芯中加入少量沸水至容量的一半，再加入2mL热稳定α-淀粉酶溶液（4.2.5），搅拌。 让热稳定α-淀粉酶反应60s。抽除热稳定α-淀粉酶溶液，用30mL沸水将回流烧杯中的残渣冲洗到砂 干，重复1次。如果第一次浸洗后残渣难以过滤，加人少量沸水至容量的一半，再加人2mL热稳 定α-淀粉酶溶液（4.2.5），搅拌，让热稳定α-淀粉酶反应60s后，抽除热稳定α-淀粉酶溶液，再重复上述 沸水浸洗操作。如果砂芯埚堵塞，可以从过滤装置上取下反向冲洗底部后重新插人。 将水抽至近干，加入50mL丙酮，搅拌使颗粒分散，浸洗5min，抽干，重复1次。用水冲洗搅拌棒 上所有黏附颗粒至砂芯埚中。 注：加人丙酮之前不能将水完全抽干，如残留物过度干燥结块，其颗粒难以分散于丙酮，不利于丙酮萃取 用真空抽干，从过滤装置取下砂芯埚，在通风橱中挥发30min，去除残余丙酮。 4.5.6干燥 将砂芯埚置于干燥箱中，105℃土2℃干燥4h，取出，放人干燥器中冷却30min，称重，精确至 0.0001g，直至恒重（2次称量结果之差不超过0.002g）。 4.5.7空白测定 取已干燥、称重的洁净砂芯，用相同质量的助滤剂（4.2.7），不加试样，按4.5.4～4.5.6进行空白 试验。 若采用纤维测定仪，按仪器操作说明书进行测定。 4.6试验数据处理 试样中中性洗涤纤维（NDF)的含量1以质量分数计，数值以质量分数（%）表示，按式（1)计算。 (m.-mi - m3) -(m ba -mbl -m b2) wi= X100 ..(1) m2 3