ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.18—2001 代替GB/T14926.18—1994 实验动物 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 521 GB/T 14926. 182001 前言 本标准是对GB/T14926.18一1994《实验动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法》的修订。 本标推删除了（G3/T14926.18一1991中*酶联免疫吸附试验，间接免疫荧光法和免疫酶染色法"的 内容。 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归I。 本标准起草单位：中国实验动物学会。 本标准主要起草人：贺争鸣， 本标准于1991年1月次发布。 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926.18—2001 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法 代替GI3/T 14926. 18—1994 Laboratory animal-Method far examination nf lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV) 1范围 本标准规定了淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)的检测方法、试剂等。 本标准适用于小鼠,豚鼠、地鼠 I.CMV 的检测。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，迦过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的齐方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T11926.50—2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 GB/T14926.51—2001实验动物免疫酶试验 3原理 根据免疫学原埋,采用T.CMV抗原检测小鼠、豚鼠、地鼠血清巾I.CMV抗体 4主要试剂和器材 4.1 试剂; 4.1.1ELISA抗原 4.1.1.1特异性抗原 在物安全柜内,川 LCMV 感染Vcro 细胞，当病变达一十十～.一十十十时,收获培养物。冻融一次 或超声波处理后·低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓后制成ELISA抗原、 4. 1. 1. 2正常抗原 Vcro细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。 4.1.2抗原片 在牛:物安全柜内,LCMV 感染 Vero 细胞,每 2～3 d 更换维持液,培养 7～10 d.用 IFA 法测定细胞 内特异性荧光。当荧光达十十～十十十时，将细胞用酶消化分,PBS洗涤·涂片。罕温T燥的同时， 在紫外线下20 cm处照射 30 min.冷丙酮固定10 min.一20℃保行。 4. 1. 3 阳性血清 用β-丙内脂灭活 LCMV抗原,免疫清洁或SPF小鼠、豚鼠、地鼠所获得的抗,血清。 4. 1. 4阴性血清 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1