UDC 668.58:576.85.07 GB C 51 中华人民共和国国家标准 GB 7918.2—87 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定 Standard methods of microbiological examination for cosmetics Standard plate count 1987-05-28发布 1987-10-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 中华人民共和国国家标准 UDC 668. 58 : 576 化妆品微生物标准检验方法 .85.07 细菌总数测定 GB 7918. 287 Standard methods of microbiological examinatlon for cosmetics Standard plate count 细菌总数系指 IB或1ml化妆品中所含的活菌数量。测定细菌总数可用来判明化妆晶被细菌污染 的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评 价的综合依据。 本标准采用标准平板计数法。 SAG 1方法提要 化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理特性，培养时对营养要求，培养温度、培 养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的 结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80 营养琼脂上，于 37℃培养 48 h)生长的一群 嗜中温的需氧及兼性厌氧的细菌总数。 ？培养基和试剂 2.1生理盐水：见 GB 7918.1一87《化妆品微生物标准检验方法总则》。 2.2卵磷脂、吐温 80-营养琼脂培养基 成分：蛋白陈 20g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15g 卵磷脂 1g 吐温 80 7g 蒸馏水 1000ml 制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余的蒸 馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温 80，混勾，调pH值为7.1～7.4，加入琼脂，121℃（15 1b) 20 min 高压灭菌，储存于冷暗处备用。 3仪器 3.1锥形烧瓶。 3.2量筒。 3. 3 pH 计或精密 pH 试纸。 3.4高压消毒锅。 中华人民共和国卫生部1987-05-28批准 1987-10-01实施 1 GB 7918.2—87 3. 5 试管。 3. 6 灭菌平血:直径 9cm。 3.7灭菌刻度吸管:10ml、2ml、1ml。 3.8 酒精灯。 3.9恒温培养箱。 3.10放大镜。 4操作步骤 4.1用灭菌吸管吸取1：10稀释的检样 2ml,分别注入到两个灭菌平皿内，每血1ml。另取 1ml注入 到9ml灭菌生理盐水试管中（注意勿使吸管接触液面），更换一支吸管，并充分混勾，使成1：100稀释 液。吸取2ml，分别注入到两个灭菌平皿内，每血1ml。如样品含菌量高，还可再稀释成11000， 1．10000，……·等，每种稀释度应换1支吸管。 4.2将熔化并冷至45~50℃的卵磷脂、吐温80、营养琼脂培养基倾注平皿内，每Ⅲ约15ml，另倾注 一个不加样品的灭菌空平血，作空白对照。随即转动平血，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固 后,翻转平血,置 37℃培养箱内培养 48h。 5菡落计数方法 先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平Ⅲ的菌落 数后。求围同一-稀释度各平血生长的平均菌落数。若乎血中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长 时，该平血不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均勾，则可蒋此半 个平皿菌落计数后乘2,以代表全皿菌落数。 6菌落计数及报告方法 6.1首先选取平均菌落数在30～300之间的平血，作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的 平均菌落数符合此范围时,即以该平Ⅲ菌落数乘其稀释倍数（见表中例1)。 6.2若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。 若其比值小于或等于2,应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数（见表中例2及例3)。 6.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300 个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告 之（见表中例4)。 6.4若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告 之(见表中例 5)。 6.5若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另 一稀释度小于30 个时，则以接近 30 或 300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例6)。 6.6若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10个。 6.7菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数学，在 二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示 （见下表报告方式栏）。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。 2 GB 7918.2—87 细菌计数结果及报告方法 不同稀释度的平 两稀释 例 菌落总数 报告方式 均菌落数 度菌数 次 个/各或个/ml 个/g 或个/ml 之 比 10-1 10- 10- 1365 164 20 16400 16000 或 1, 6× 10 1 2 2760 295 46 1. 6 38000 38000 或 3. 8X 10- 2890 271 60 2. 2 27100 3 27000 或 2. 7× 10 不可计 4650 513 513000 4 510000 或 5. 1 × 10s 5 27 11 5 - 270 270 或 2. 7× 103 6 不可计 908 12 30500 31000或 3.1× 104 附加说明; 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。 本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。 本标推主要起草人周淑玉。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。 GB 7918.2—87 细菌计数结果及报告方法 不同稀释度的平 两稀释 例 菌落总数 报告方式 均菌落数 度菌数 次 个/各或个/ml 个/g 或个/ml 之 比 10-1 10- 10- 1365 164 20 16400 16000 或 1, 6× 10 1 2 2760 295 46 1. 6 38000 38000 或 3. 8X 10- 2890 271 60 2. 2 27100 3 27000 或 2. 7× 10 不可计 4650 513 513000 4 510000 或 5. 1 × 10s 5 27 11 5 - 270 270 或 2. 7× 103 6 不可计 908 12 30500 31000或 3.1× 104 附加说明; 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。 本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。 本标推主要起草人周淑玉。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。