ICS 65.020 B 16 GR 中华人民共和国国家标准 GB/T 22101.4—2009 棉花抗病虫性评价技术规范 第4部分：枯萎病 Technical specification for evaluating resistance of 2009-10-30发布 2009-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T22101.4—2009 前言 GB/T22101《棉花抗病虫性评价技术规范》分为以下五个部分： 第1部分：棉铃虫； 第2部分：蚜虫； —第3部分：红铃虫； 一第4部分：枯萎病； 一第5部分：黄菱病。 本部分是GB/T22101的第4部分。 本部分的附录B为规范性附录，附录A为资料性附录。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。 本部分主要起草人：简桂良、孙文姬、马存、石磊岩、邹亚飞、郭荣。 GB/T22101.4—2009 棉花抗病虫性评价技术规范 第4部分：枯萎病 1范围 GB/T22101的本部分规定了棉花抗枯萎病［病原菌：尖镰孢菱為专化型（Fusariumo.cysporum Schl.f.sp.vasinfectum（Atk.）SnyderetHansen）的鉴定方法和抗性评定标准。 本部分适用于棉花抗枯萎病性鉴定和抗性评定。 2术语和定义 下列术语和定义适用于GB/T22101的本部分。 2. 1 发病率rateof infected 发病棉苗占总棉苗数的百分率。 2.2 病情指数disease index 全面考核发病率和严重程度的综合指标。 3病原菌的培养 3.1培养病原菌的基本设备 恒温箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温的温室（使温度保持在20℃～28℃之间）、塑料 盆、铝锅、电炉、培养皿、试管、剪子、镊子、广口瓶、酒精灯等。 3.2鉴定所用枯萎病菌小种 由于棉花枯菱病菌7号小种分布最广，为此宜选用7号小种，但各地亦可根据当地的优势小种，选 择所用菌系。 3.3枯萎病病原菌培养 枯萎病病原菌（参见附录A)菌种培养物采用麦粒或麦粒砂培养（麦砂比为3：1)，先将麦粒用水浸 泡12h以上，再用水煮涨为止，沥干水分后拌人细砂，装人广口瓶，湿热灭菌2h；在超净工作台上将已 培养好的枯萎病菌平板或斜面接入其中，随后置于25℃温箱培养7d～10d。 3.4鉴定用病土的接菌 用筛过的无病土，经160℃干热灭菌。然后，将病菌麦粒或麦粒砂培养物按土重的2%～3%的比 例加入到灭菌王中，混合均匀。用干净的报纸卷成直径6cm，高8cm的有底纸钵，将已混均匀的带菌 土装人钵中，至2/3高度，随后将其装人30cm×20cm×9cm的塑料盆中，待用。 3.5鉴定材料种植方法 鉴定材料种植于温室，采用纸钵土壤接菌盆栽法。3次重复，每重复一盆12钵，每个鉴定材料3盆， 共36钵；播种前每盆先浇300mL自来水，使钵中的土吸足水分，随后将已催芽的待鉴定品种的种子先 拌5%的多菌灵杀菌剂，再摆放于钵中，每钵6粒～8粒棉籽；然后用无菌土覆盖（高度与钵平齐），再浇 人200mL自来水 3.6标准对照 鉴定中选用一个感病对照和一个抗病对照，抗病对照采用“86-1号”，感病对照可选用“冀棉11号” 1 GB/T22101.4—2009 或“鄂荆1号”或本地区的常规感病品种。抗病对照选择标准为在常规接菌量下病情指数小于10的品 种；感病对照选择标准为在常规接菌量下病情指数大于50的品种。 4调查记载方法 4.1棉苗的管理 播种后将塑料盆置于温室中，进行育苗，温室温度保持在23℃～28℃之间，切勿超过30℃，进行 精心管理。棉苗拱土前，只要钵中土壤不会太干，一般不要再浇水。棉苗出土后，注意保持盆中的干湿 度，主壤湿度保持在60%～80%为宜，早晚注意温度变化，防止温度过高和过低。 4.2发病调查 在棉苗第一片真叶长出后，棉花枯萎病陆续开始发生，在播种后一个月左右开始调查各品种的枯菱 病发生情况，调查鉴定结果记录到鉴定结果原始记录表，见附录B。采用5级分级法，可进行数次调查， 当感病对照病情指数达50以上时，即可全面调查各品种的发病率，求出病情指数，进行校正后，评判各 品种的抗病水平。 4.3调查分级标准 温室苗期棉花枯萎病的主要症状为青枯型和黄色网纹型，真叶和子叶发生萎焉，叶片变软，下垂，叶 缘开始调枯，叶脉变黄，以致叶片枯萎，棉株死亡。各病级分级标准如下： 0级：棉株健康，无病叶，生长正常。 1级：棉株1片～2片子叶变黄萎焉 2级：棉株2片子叶和1片真叶变黄萎，叶脉呈黄色网纹状 3级：棉株2片子叶及2片或2片以上真叶变黄萎焉，叶脉呈黄色网纹状或青枯状；棉株矮化或 萎為。 4级：棉株所有叶片发病，棉株枯死。 4.4调查结果的统计 根据调查的结果计算各品种的发病率和病情指数。 发病率以“R”计，数值以“%”表示，按式（1）计算： Ri=×100 (1) nt 式中： n;发病株数； nt总株数。 计算结果精确到小数点后两位。 病情指数以"DI"计，按式(2)计算： .(2) nX4 式中： d。—相应病级； n—各病级病株数； n.—总株数。 计算结果精确到小数点后两位。 SAG 5鉴定结果的校正 由于鉴定的外界条件，包括地区间不可能完全一致，即使同一地区年度间、批次间鉴定结果也可能 存在差异。为此，应对鉴定结果进行校正，即采用相对病情指数进行校正。方法为：鉴定中必须设感病 2 GB/T 22101.4—2009 对照，在感病对照病情指数达50.0以上时进行发病调查，由于感病对照病情指数不可能刚好为50.0， 为此，采用校正系数K来进行校正，K值的求法按式（3）计算： 50.00 K= .......(3) DIck 式中： 50.00- 感病对照标准病情指数； DIck- 本次鉴定感病对照病情指数 用K值与本次鉴定中被鉴定品种的病情指数相乘，求得被鉴定品种的相对病情指数（RDI）,RDI 按式(4)计算： RDI = DI X K :(4) 式中： DI被鉴定品种病情指数； K——校正系数。 以K值在0.75～1.25（相当于病情指数66.67~40.00)范围之间的鉴定结果为准确可靠 鉴定结果的评价 6 根据被鉴定品种的相对病情指数的大小评定品种的抗性级别，各级别评定标准如表1。 表1棉花品种抗枯萎病性评定标准 级别 抗性类型 英文缩写 相对病情指数标准 1 免疫 I RDI=0 2 高抗 HR 0<RDI≤5.0 3 抗病 R 5.0<RDI≤10.0 4 耐病 T 10.0<RDI≤20.0 5 感病 s RDI>20.0 3