ICS 65.150 B 50 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T18654.14—2008 养殖鱼类种质检验 第14部分：DNA含量的测定 Inspection of germplasm for cultured fishes- Part 14:Determination of DNA content 2008-06-27发布 2008-10-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T18654.14—2008 前言 GB/T18654《养殖鱼类种质检验》分为下列部分： 第1部分：检验规则； 第2部分：抽样方法； 第3部分：性状测定； 第4部分：年龄与生长的测定； 第5部分：食性分析； 第6部分：繁殖性能的测定； 第7部分：生态特性分析； 第8部分：耗氧率与临界室息点的测定； 第9部分：含肉率测定； 第10部分：肌肉营养成分的测定； 第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定； 第12部分：染色体组型分析； 第13部分：同工酶电泳分析； 第14部分：DNA含量的测定； 第15部分：RAPD分析； 本部分为GB/T18654的第14部分。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。 本部分起草单位：上海水产大学、中国水产科学研究院长江水产研究所。 本部分主要起草人：李思发、赵金良、徐忠法、蔡完其、邹曙明。 GB/T 18654.14—2008 养殖鱼类种质检验 第14部分：DNA含量的测定 1范围 GB/T18654的本部分规定了鱼类脱氧核糖核酸（DNA)含量测定的试剂与材料、仪器和设备、 抽样、分析步骤和结果判定。 本部分适用于常见淡水、海水养殖鱼类。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T18654的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T18654.1—2002养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法 3试剂与材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 3.1磷酸氢二钠（NazHPO,）。 3.2 二个结晶水的磷酸二氢钠（NaH,PO4·2H,O）。 3.3 生理盐水：0.75%氯化钠(NaCI)溶液。 3. 4 固定液：3份甲醇加人1份冰乙酸，现配现用。 3.5 肝素溶液：浓度为500IU/mL。 3. 6 胰酶：浓度为5mg/mL。 3.7 核糖核酸酶（RNase)：1mg/mL。 3.8 碘化丙啶（PI）：浓度为50μg/mL。 3.9 0.1mol/L磷酸缓冲液（PBS）：Na2HPO,12.35g、NaH,PO·2HO20.3g，蒸馏水定容至1L 仪器和设备 4.1 离心机：转速为5000r/min，常温。 4. 2 流式细胞仪。 4. 3 10mL离心管及试管架。 4. 4 5mL试管及试管架。 4. 5 吸管。 4. 6 52mL注射器。 4.75号针头。 4.8 锦纶筛网（或涤纶筛网）：规格为80孔/cm。 4.9 封口膜。