ICS_65. 160 X 87 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 23224—2008 烟草品种抗病性鉴定 Identification of cultivar resistance to tobacco disease 2008-12-31发布 2009-06-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T23224—2008 前言 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会（SAC/TC144)归口。 本标准起草单位：中国烟草总公司青州烟草研究所 本标准主要起草人：孔凡玉、王凤龙、张成省、钱玉梅、王静、陈德鑫、申莉莉 GB/T23224—2008 烟草品种抗病性鉴定 1范围 本标准规定了烟草品种对由病原真菌、细菌、病毒和根结线虫等引起的主要病害的抗病性鉴定及抗 性评价方法。 本标准适用于各类型烟草品种的抗病性鉴定。 SAG 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T23222烟草病虫害分级及调查方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 致病性分化 variation ofpathogenicity 病原物由于突变、杂交、适应性变异、不同孢子细胞质的异质性等致使生理小种改变，导致致病性 差异。 3. 2 人工接种鉴定 artificial inoculation for identification 用人工繁殖或收集的病原物，按一定量接种，创造发病条件，根据接种对象发病程度确定品种抗病 性强弱。 3.3 对照品种controlcultivar 为了检验试验的可靠性，在品种鉴定时附加的抗病品种和感病品种 4品种抗病性鉴定 4.1黑胫病 4.1.1田间病圃鉴定 4.1.1.1鉴定方法 选择排灌方便，肥力水平中等，连年发病较重的烟田作鉴定圃，病圃应明确病原生理小种类别。每 个品种种植1行，每行20株以上，至少3次重复，随机排列，每重复设抗病品种“革新三号”、中抗品种 “金星6007”和感病品种“小黄金1025”各1行为对照。另设当地种植的抗、中、感品种作为辅助对照。 参鉴烟草品种在全生育期内不应使用杀菌剂，杀虫剂的使用根据病圃内害虫发生种类和程度而定 人工接种鉴定，接种体选用当地优势生理小种或根据试验需要选取菌株。烟草移至大田成活后 (10d～20d)用菌谷接种，每株接种量4g。接种后若天气干旱应灌水，以使田间土壤含水量处于饱和 状态。 1 GB/T23224—2008 菌谷制作方法：将谷子煮至约一半谷粒开花，捞出，装人三角瓶，高压灭菌1h。将已培养好的黑腔 病菌种，接种到灭菌后冷却的谷子上，然后置于28℃～30℃下培养15d～20d即成。 4.1.1.2分级及调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：于发病初期、盛期和末期各调查1次，每次均应调查各品种全部植株 4.1.2室内接种鉴定 4.1.2.1鉴定方法 烟苗长至5片～6片真叶时，移栽至直径大于10cm的花盆，每盆2株。每品种10株～20株，对照 品种设置同4.1.1.1，待烟苗成活后，每株按0.25g0.50g菌谷量接种，置于温度28℃C、相对湿度 80%的条件下诱发病害。 4.1.2.2分级及调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：接种后第3d、5d、7d、10d调查病情。每次均应调查各品种全部植株。 4.2青枯病 4.2.1田间病圃鉴定 4.2.1.1鉴定方法 选择排灌方便，肥力水平中等，连年发病较重的烟田作鉴定圃，观察品种对青枯病的抗性。每品种 种植1行，每行20株，至少3次重复，随机排列，设抗病品种“D101”、感病品种“长脖黄”为对照。各地 增设当地抗、中、感品种为对照。参鉴烟草品种在全生育期内不使用杀菌剂，杀虫剂的使用根据病圃内 害虫发生种类和程度而定。 4.2.1.2分级及调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：在田间发病初期、盛期和末期，进行田间调查，每次均应调查各品种全部植株。 4.2.2室内苗期接种鉴定 4.2.2.1鉴定方法 烟苗长至5片～6片真叶时，移栽至直径大于10cm的花盆，待烟苗成活后，用伤根灌菌液的方法， 每个品种至少5株烟苗，3次重复以上。对照品种设置同4.2.1.1。每株灌20mL的青枯菌悬浮液 接种体制备：接种体选用当地流行病原菌或根据试验需要选取菌株。将4C下保存于无菌水中的 青枯菌，在肉汁培养基平板上划线，28℃30℃下培养24h，挑取典型菌落移置于肉汁斜面，28℃培养 24h后移至肉汁斜面，继续培养24h后用无菌水稀释，至所需要的接菌浓度 4.2.2.2分级及调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：接种后第7d、10d、15d、21d、30d进行调查，每次均应调查各品种全部植株 4.3炭疽病 4.3.1菌种的培养 菌种的培养采用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，26℃下培养7d，用培养产生的分生孢子制备悬 浮液供接种用。 4.3.2接种材料的准备 将烟苗移栽到直径大于10cm的花盆内，每品种至少3次重复，每重复至少5株烟苗。 4.3.3接种方法 于烟苗5片6片真叶时进行炭疽菌孢子（1×106CFU/mL）接种，用小型手持喷雾器将孢子悬浮 2. GB/T23224—2008 液喷洒到植株上，以叶片正反面充分湿润为宜。接种后在保持温度26℃～30℃、相对湿度80%以上环 境条件下生长。 4.3.4分级及调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：接种后第5d、10d、20d分别调查发病程度，每次均应调查各品种全部植株 4.4根结线虫病 4.4.1温室接种鉴定 4.4.1.1接种体制备 接种体选用当地优势种及生理小种或根据试验需要选取，利用感病的番茄品种"Rutgers”接种繁殖 根结线虫，在25℃～30℃下生长55d～60d后即可作为接种体使用。 4.4.1.2接种方法 采用线虫卵或病土接种法。烟苗长至3片～4片真叶时，移栽至直径大于10cm的花盆内，烟苗每 盆接种5000个线虫卵；或将其栽入装有病土（病根及根际病土与消毒营养土按1：4混合）的花盆中， 接种后按常规管理并防止其他病虫干扰。在室温为25℃～30℃条件下生长。设感病品种长脖黄”、 抗病品种“T1706”和“NC95”为对照。设当地的抗病品种、中抗品种和感病品种为对照。每处理5株， 随机排列，至少3次重复。 4.4.1.3分级及调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：接种后2个月，拔出烟株，用自来水冲去根部泥土，调查全部烟株根结线虫病病情。 4.4.2田间鉴定 4.4.2.1鉴定方法 选择根结线虫连年为害较重的田块，在自然发病条件下，鉴定品种对根结线虫的抗性，每品种至少 种1行，每行20株，随机排列，至少设3次重复，对照品种与4.4.1.2相同 4.4.2.2分级与调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定 调查时间：收获期拔根调查病情，调查全部烟株根结线虫病病情。 4.5赤星病 4.5.1温室苗期接种鉴定 4.5.1.1接种体的制备 的孢子悬浮液作为接种液。 4.5.1.2接种材料的准备 将烟苗移栽至直径大于10cm的花盆内，每品种20盆，每盆2株，至少设3次重复。 4.5.1.3接种方法 于烟苗9片～10片真叶时进行赤星病孢子（1X105CFU/mL）接种，用小型手持喷雾器将孢子悬浮 液喷酒到植株上，然后置于人工气候箱内，设定温度26℃~30℃相对湿度70%。设感病品种 “G140”抗病品种“净叶黄”为对照，设当地种植的抗病品种、中抗品种和感病品种作为辅助对照。 4.5.1.4分级与调查方法 病害严重度分级应符合GB/T23222的规定。 调查时间：接种后第7d、10d、20d调查发病程度。 3