ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 23182—2008 饲料中兽药及其他化学物检测试验规程 Procedure for veterinary drug and other chemicals determination in feeds 2008-12-31发布 2009-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 23182—2008 前言 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)提出并归口。 本标准负责起草单位：中国农业大学动物医学院、中国兽医药品监察所。 本标准主要起草人：沈建忠、徐士新、张素霞、程林丽、常碧影、吴聪明、江海洋 GB/T23182—2008 饲料中兽药及其他化学物检测试验规程 1范围 本标准规定了对饲料中药物、微量化学添加剂和化学污染物检测试验的基本要求（包括检测方法确 立、检测方法性能检验、标准曲线制作、检出物确证、结果计算与表述、试验报告撰写等）。 本标准适用于指导配合饲料、浓缩饲料及添加预混合饲料中兽药、违禁使用药物及其他化学污染物 的仪器分析试验。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T14699.1饲料采样（GB/T14699.12005.ISO6497.2002.IDT) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 灵敏度sensitivity 分析方法对单位浓度或单位量待测物变化可产生的响应量的变化程度。 3.2 检测限limit of detection;LOD 分析方法在给定的置信度内可以从样品背景信号中检出被测物的最低量（或最低浓度），但不一定 准确定量。 3. 3 定量限limitof quantification；LOQ 分析方法在满足定量要求（精密度及准确度）的前提下，能定量测出样品中被测物的最低量（或最低 浓度)。 3. 4 准确度 accuracy 样品中待测物测定值（结果）与被测量真值或约定真值间的一致程度。 3.5 回收率recovery 已知确切含量样品中的待测物或添加到空白样品中的测试物测定值占其真实值的百分比。 3.6 精密度precision 分析方法重复测定同一样品所得测定值间的一致程度。 3.7 相对标准偏差 relativestandarddeviation;RSD 变异系数coefficientofvariation;CV 多次测定值的标准差（SD)与算术平均值的百分比。 1 GB/T23182—2008 3.8 重复性repeatability 在重复性条件下，相互独立的测试结果之间的一致程度。 3.9 重复性条件repeatabilityconditions 在同一实验室，由同一操作者使用相同设备和试剂，按相同的测试方法，并在短时间内从同一被测 对象取得相互独立结果的条件。 3.10 再现性reproducibility 在再现性条件下，测试结果之间的一致程度。 3.11 再现性条件reproducibilityconditions 在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备和试剂，按相同的测试方法，从同一被测对象取 得测试结果的条件。 3. 12 线性范围 linearrange 4饲料菜样 按照GB/T14699.1规定的方法和程序进行。采样对象只限于各种配合饲料、浓缩饲料及添加预 混合饲料（包括颗粒状、粉状、半固体状及液体状饲料）。 5饲料中兽药及其他化学物的检测 5.1检测方法确立及基本要求 检测方法可选择国际标准化组织（ISO）、联合国粮农组织/世界卫生组织（FAO/WHO)或其他机构 推荐的方法，欧盟、美国等先进地区、国家的标准，我国国家标准方法或文献报道的经确证的方法，也可 根据自已实验室条件，针对样品基质种类和待测物理化性质确定相应的提取、净化方法和仪器检测条 件，建立标准操作程序（步骤）。但所有确立的检测方法都要进行方法验证，即进行方法性能检验，证明 所选方法符合分析要求、切实可行。 采用仪器方法检验时，首先需要建立药物与仪器响应之间的关系，通常采用标准曲线来表示。利用 不少于5点（不包括原点）的实验数据算出待测物与仪器响应值之间的线性回归方程并计算相关系数 (r）；以待测物的绝对量（如μg）或浓度（如μg/mL)为横坐标，响应值（峰高或峰面积）为纵坐标制作标准 曲线，确定线性范围。线性相关系数应该大于0.99。 5.2单一实验室的方法验证一一方法的性能检验 主要由标准曲线、检测限、定量限、准确度和精密度来衡量。 5.2.1标准曲线 相关论述见5.1。 5.2.2检测限、定量限 检测限用于考虑方法是否具备灵敏的检测能力。常根据检测对象、检测目的不同对检测方法的检 测限作出具体规定， 当样品中的被测物为充许添加药物或其他化学物时，分析方法的检测限至少应为充许添加浓度的 1/2～1/5；当样品中的被测物为违禁使用药物时，分析方法的检测限应足够低。确定检测限时，需指出 其确定标准如待测物信号与噪声的比例，即信/噪比≥3或其他。定量限则可确定为校准曲线的最低点 2 GB/T23182—2008 或信/噪比≥10等。 5.2.3准确度 检测方法的准确度可用方法加标回收率表示 用添加法测定方法回收率，原则上添加浓度应以接近样品中待测药物的浓度为宜。但由于样品中 待测药物浓度是未知的，因此，对于充许添加药物或其他化学物，一般应选择充许添加浓度的0.5倍、 1倍和2倍3个浓度水平用添加法测定方法回收率；对于饲料中的违禁使用药物，则应选择定量限和高 于定量限2倍～10倍的2个浓度水平用添加法测定方法回收率。每一个浓度5个样，重复试验次数不 少于3次。不同添加浓度的回收率要求见表1。 表1不同添加浓度的回收率要求 添加浓度c/（mg/kg） 平均回收率/% c>1.0 70~110 0.1<≤1. 0 60~120 0.1 50~120 5.2.4精密度 精密度常用重复性和再现性衡量，而重复性又以室内相对标准偏差（RSD)或变异系数（CV)表示 再现性则以室间相对标准偏差（RSD)或变异系数（CV)表示。 由于相对标准偏差与样品中待测物添加浓度相关，在进行样品中待测物室内RSD测定时，需制备 不同添加浓度的试样（如X，X和2X），各测定3次或在允许添加浓度X下至少测定5次来确定。样 品中不同浓度待测物的室间相对标准偏差要求见Horwitg公式。室内相对标准偏差约为室间的 0.33倍～0.5倍之间。 Horwitg公式:RSDr=2X(1-0.5lgc) 5.3多个实验室间的方法验证 对检测标准方法或公用方法进行多个实验室间的验证试验时，对于等同采用的国外标准、修改采用 的国外标准以及参考国外方法建立的检测方法标准，方法由1个实验室建立后要经另外2个实验室进 行复核；对于原创性的检测方法，则应由3个～5个实验室进行验证。若参加验证试验的实验室为2个， 则所提供的结果数据要在统计估计的置信区间内 验证试验时，应对方法检测限和定量限进行复核。 验证试验时，添加回收率测定一般选择0.5倍允许添加浓度、1倍允许添加浓度和2倍允许添加浓 度3个浓度水平。若添加物为违禁使用药物，则应选择定量限和高于定量限2倍～10倍的2个浓度水 平用添加法测定方法回收率。每一个浓度5个样，重复试验次数不少于3次 实验室内部或不同实验室间进行验证试验，对不同添加浓度的精密度（包括重复性和再现性）要求 见表2。 表2复核试验不同添加浓度的精密度要求 变异系数CV/% 待测物添加浓度c/（mg/kg） 重复性 再现性 c>10 10 16 1<<10 15 23 0.1<≤1 20 32 c≤0.1 30 45 3