ICS 71. 100. 70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T22728—2008 化妆品中丁基羟基茴香醚（BHA）和 二丁基羟基甲苯（BHT)的测定 高效液相色谱法 Determination of butylated hydroxyanisole (BHA) and butylated hydroxytoluene (BHT) in cosmetics- High performance liquid chromatography 2008-12-31发布 2009-08-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T22728—2008 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院 本标准主要起草人：陈会明、郝楠、于文莲、周新、白桦、刘娟、卢加文。 GB/T22728—2008 化妆品中丁基羟基商香醚（BHA）和 二丁基羟基甲苯（BHT)的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中丁基羟基茴香醚（BHA）和二丁基羟基甲苯（BHT)的液相色谱测定方法。 测定。 本标准的方法检出限：丁基羟基香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT)均为0.005% 2原理 用甲醇超声提取化妆品中的BHA、BHT，离心分离，取上清液过滤，滤液经配有紫外检测器的高效 液相色谱仪检测，外标法定量。 3试剂与材料 除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为二次去离子水或重蒸水。 3.1甲醇 优级纯或者色谱纯。 3.2标准品 BHA，纯度不小于98%（其中3-BHA，纯度不小于90%2-BHA，纯度不大于8%）；BHT，纯度不小 于99%。 3.3标准储备液 BHA的标准储备液：准确称取BHA标准品0.1g，精确至1mg，用甲醇溶解后转移至100mL容 量瓶中，甲醇定容，振荡均匀，即得BHA质量浓度为1000μg/mL的标准储备液。 BHT的标准储备液：准确称取BHT标准品0.1g，精确至1mg，用甲醇溶解后转移至100mL容 量瓶中，甲醇定容，振荡均匀，即得BHT质量浓度为1000μg/mL的标准储备液。 4仪器 4.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。 4.2超声波清洗器。 4.3高速离心机：不小于15000r/min。 4.4注射式样品过滤器：配有有机相滤膜，滤膜孔径0.45μm。 4.5锥形瓶：具磨口塞，50mL。 4.6容量瓶：100mL、25mL。 5测定 5.1试样处理 5.1.1固体、膏状化妆品：称取化妆品0.5g（精确到1mg）于50mL锥形瓶中，加人甲醇25.00mL，超 声提取20min，以12000r/min高速离心15min，上清液过0.45μm滤膜，滤液供测试。 1 GB/T22728—2008 5.1.2液体化妆品：称取液体化妆品（香水、爽肤水等）0.5g（精确到1mg）于25mL容量瓶中，用甲醇 定容至刻度，充分摇匀，上清液过0.45μm滤膜，滤液供测试。 5.2标准工作曲线的绘制 分别吸取10.00mL的BHA和BHT标准储备液（3.3)于50mL容量瓶中，用甲醇定容后摇匀，即 得质量浓度为200ug/mL的混合标准工作溶液，逐级稀释该溶液得到质量浓度为100μg/mL、 50μg/mL、25μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL的混合标准工作溶液，供高效液相色谱测定，得出 标准工作曲线 5.3测定步骤 5.3.1色谱条件 a){ 色谱柱：Ci8，5μm，250mm×4.6mm（内径）或相当者； b) 流动相：甲醇：水（10：1)； c) 流速：1.0mL/min； d) 检测波长：278nm； e）s柱温：室温； f）进样量：10μL。 5.3.2高效液相色谱测定 分别准确吸取样品待测液（5.1)及标准工作溶液（5.2)注人高效液相色谱仪，应用5.3.1规定的色 谱条件进行测定。在选定色谱条件下，标准溶液（5.2）按质量浓度由稀至浓顺序依次进样，得到峰面积 与质量浓度的标准工作曲线。试样溶液中的BHA、BHT的响应值应在标准工作曲线的线性范围内。 在5.3.1规定的色谱条件下，BHA、BHT标准物质的保留时间分别为3.924min、8.955min。BHA和 BHT标准物质的色谱图参见附录A中图A.1。 5.4空白试验 除不加试样外，均按上述步骤（5.1~5.3）同时完成空白试验 6结果计算 结果按式（1）计算，计算结果保留到小数点后两位，计算结果需扣除空白值。 X 100 :(1) m×10% 式中： X—BHA或BHT的含量,%; Ci——标准曲线查得的BHA或BHT的质量浓度，单位为微克每毫升（μug/mL）； V——样品稀释后总体积，单位为毫升（mL）； m—样品质量，单位为克(g)。 7回收率和精密度 添加质量浓度为0.01%～1.00%时，BHA的回收率为93.6%～103.9%，相对标准偏差为 0. 24% ~2. 70% ; 添加质量浓度为0.01%～1.00%时，BHT的回收率为97.5%～108.5%，相对标准偏差为 0.27%~2.29% 2 GB/T 22728—2008 附 录 A （资料性附录） 标准物质色谱图 1 E n9 og 40 30 - 2 20 Fot 0 - T 0 2 oT 4 6 8 14 :irin 1——丁基羟基茴香醚(BHA); -二T基羟基甲苯（BHT)。 图 A.1 BHA、BHT标准物质高效液相色谱图