ICS 71.040.40 Y43 中华人民共和国国家标准 GB/T 40191—2021 牙膏中限用防腐剂的测定 高效液相色谱法 Determination of restricted preservatives in toothpaste- High performance liquid chromatography method 2021-05-21发布 2021-12-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 40191—2021 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会（SAC/TC492）归口。 本标准起草单位：江苏省产品质量监督检验研究院，江苏省理化测试中心。 本标准主要起草人：王伟、徐慧、汪洪涛、余倩、朱婕好、晓丽、洪华、朱宇宏、张晓强、王莉、蔡晶、 徐晓萍、朱莉、肖云。 GB/T 40191—2021 牙膏中限用防腐剂的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了牙膏中限用防腐剂山梨酸和苯甲酸含量的高效液相色谱（HPLC)测定方法。 本标准适用于牙膏中限用防腐剂山梨酸和苯甲酸及其盐类含量的测定。 本标准方法检出限为0.5mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 样品用纯水提取后，上清液经0.45um滤膜过滤，用高效液相色谱-紫外检测法测定，保留时间定 性，外标峰面积法定量。 4试剂和标准物质 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水 4.1甲醇：色谱纯。 4.2氨水溶液（1十+1）：氨水加水等体积混合。 4.3 3乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45μm滤膜过滤。 4.4碳酸氢钠溶液（20g/L）：称取2.0g碳酸氢钠（优级纯），加水至100mL，摇动溶解。 4.5苯甲酸标准储备液：称取0.1g（精确至0.0002g）苯甲酸，加碳酸氢钠溶液（4.4)5mL，加热溶解， 移至100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸质量浓度为1mg/mL，作为标准储备液备用。 4.6山梨酸标准储备液：称取0.1g（精确至0.0002g）山梨酸，加碳酸氢钠溶液（4.4)5mL，加热溶解， 移至100mL容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸质量浓度为1mg/mL，作为标准储备液备用。 4.7混合标准溶液：分别移取苯甲酸和山梨酸标准储备液各10mL至100mL容量瓶中，加水定容至 刻度线。配制成质量浓度为100mg/L的苯甲酸、山梨酸混合标准溶液。经0.45μm滤膜过滤。 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。 5.2分析天平：感量为0.0001g。 5.3 pH计。 5.4超声波清洗器。 1 GB/T401912021 5.5 5高速离心机。 5.6 6比色管：10mL/25mL。 6 试样制备 牙膏样品挤弃约20mm后，准确称取均匀的样品1.0000g（精确到0.0002g）于比色管中，加人 10mL纯水，振荡超声30min，用氨水调节pH值至7振荡15min后加人纯水定容至25mL，充分摇 匀后静置，静置后转移上层清液至离心管，4000r/min离心10min，取上清液过0.45um微孔滤膜后进 样检测。 7高效液相色谱测定 7.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： 色谱柱：Cis不锈钢柱（250mm×4.6mm×5μm）。 a) b) 检测波长：230nm。 流动相：甲醇/乙酸铵水溶液（0.02mol/L）（5：95，体积比）。 (P 流速：1.0mL/min。 柱温：30℃。 f) 进样量：10uL。 7.2 2标准工作液制备 将100mg/L的混合标准溶液（4.7）用流动相液逐级稀释，配置成50mg/L、20mg/L、10mg/L、 5mg/L的标准工作液。经0.45μm滤膜过滤备用。在设定色谱条件下，分别取10μL进行分析。以标 准系列溶液的质量浓度为横坐标（mg/L）、对照品峰面积为纵坐标绘制校准曲线（线性相关系数R》 0.9990）。苯甲酸和山梨酸混合标准样品液相色谱图参见附录A中图A.1。 7.3 测定步骤 梨酸的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。 7.4 空白试验 除不加试样外，均按第6章的处理步骤和7.1的仪器条件进行检测。 8结果计算 结果按式（1)计算，计算结果保留两位有效数字。 (1)... m×100 式中： X—试样中山梨酸或苯甲酸的质量分数，单位为毫克每千克（mg/kg）； 通过标准曲线求得试样溶液中的山梨酸或苯甲酸的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）； p 通过标准曲线求得的空白试剂中山梨酸或苯甲酸的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L） 2