ICS 65.120 B 46 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 1874—2013 动物源性饲料中挥发性盐基氮的测定 Determination of the Total Volatile Basic Nitrogen in Animal-derived Feed 2013 – 09 – 25 发布 吉林省质量技术监督局 2013 – 12 – 01 实施 发 布 DB22/T 1874—2013 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位：吉林大学。 本标准主要起草人：张晶、周虚、周长海、丁洪浩、金永成、王鹏、赵云、李莉、魏薇。 I DB22/T 1874—2013 动物源性饲料中挥发性盐基氮的测定 1 范围 本标准规定了动物源性饲料鱼粉、肉骨粉、血球粉中挥发性盐基氮测定原理、试剂、仪器、采样与 样品制备、测定步骤、精密度。 本标准适用于动物源性饲料鱼粉、肉骨粉、血球粉中挥发性盐基氮含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5009.1-2003 食品卫生检验方法 理化部分总则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 19164 鱼粉 GB/T 20193 饲料用骨粉及肉骨粉 GB/T 23875 饲料用喷雾干燥血球粉 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 动物源性饲料 animal-derived feed 以动物或动物副产品为原料，经工业化加工、制作的单一饲料。 3.2 鱼粉 fish meal 一种或多种鱼类为原料，经去油、脱水、粉碎加工后的高蛋白质饲料。 3.3 肉骨粉 meat and bone meal 以动物屠宰后不宜食用的下脚料以及肉类罐头厂、肉品加工厂等的残余碎肉、内脏、杂骨等为原料， 经高温消毒、干燥粉碎制成的粉状饲料。 3.4 血球粉 animal blood cells for feedstuffs 1 DB22/T 1874—2013 动物鲜血分离出血浆后，经喷雾干燥制成的产品。 3.5 挥发性盐基氮 total volatile basic nitrogen 动物源性食品由于酶和细菌的作用，在腐败过程中使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物 质。 3.6 四分法 method of coning and quartering 样品平铺在一张平坦而光滑的一张方形纸或塑料布、帆布等上，提起一角，使饲料流向对角，随即 提起对角使其流回，如此法，将四角轮流反复提起，使饲料反复移动混合均匀，然后将饲料堆成等厚的 正四方形体或圆锥，用药铲、刀子或其他适当器具，在饲料样品方体上划一“十”字，将样品分成4等份， 任意弃去对角的2份，将剩余的2份混合，继续按前述方法混合均匀、缩分，直至剩余样品数量与测定所 需要的用量相接近时为止。 4 原理 动物源性饲料中的挥发性盐基氮在氧化镁碱性条件下蒸馏，以氨的形式释放，硼酸吸收液吸收，再 以盐酸标准溶液滴定，即可根据盐酸标准溶液的消耗量计算出试样中挥发性盐基氮的含量。 5 试剂 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 5.1 硅油消泡剂。 5.2 硼酸溶液（30 g/L）：称取硼酸（H3BO3，分子量 61.83，CAS 号：10043-35-3/11113-50-1）30 g， 溶于 1000 mL 水中。 5.3 氧化镁混悬液（10 g/L）：称取氧化镁（MgO，分子量 40.30，CAS 号：1309-48-4）10 g，加 1000 mL 水，振摇成混悬液，此溶液当天配制当天使用。 5.4 混合指示剂：将 2 g/L 甲基红乙醇溶液与 1 g/L 次甲基蓝乙醇溶液，临用时等体积混合。 5.5 盐酸标准溶液（0.01 mol/L）：吸取浓盐酸 0.85 mL 定容至 1000 mL，摇匀。应按 GB/T 5009.1 中附录 B 的方法进行标定。 6 仪器 6.1 分析天平，感量±0.0001 g。 6.2 离心机。 6.3 半微量凯式定氮器。 6.4 微量酸式滴定管，最小分度值 0.01mL。 7 采样与样品制备 7.1 采样 2 DB22/T 1874—2013 应按 GB/T 14699.1方法采样，选取具有代表性的试样至少2 kg。 7.2 样品制备 用四分法缩减至约250g，粉碎全部通过40目分析筛，充分混合均匀，然后装入样品瓶中，密闭保存 备用。 8 测定步骤 8.1 样品处理 称取试样（7.2） 约10g，精确到 0.0001g，于250mL锥形瓶中，再加入100mL蒸馏水，不时振摇， 浸提30min 后，用滤纸过滤或1000 g离心10 min分离，滤液或上清液备用。 8.2 蒸馏 将盛有10mL吸收液（5.2）并加5 滴～6 滴混合指示液（5.4）的锥形瓶置于半微量凯氏定氮器的冷 凝管下端，并使冷凝管的下端插入吸收液的液面下。准确吸取5.0 mL上述样品滤液（8.1）于蒸馏器反 应室内，加5 mL氧化镁混悬液（5.3），加1滴～2滴硅油消泡剂（不易起泡的动物源性饲料不需要加硅 油消泡剂；而易起泡的如血浆、血球、血粉等，必须滴加1 滴~2 滴硅油消泡剂（5.1），迅速封塞，并 加水封以防漏气；通入蒸汽进行蒸馏，当冷凝管出现第一滴冷凝水时，开始计时，蒸馏5 min即停止。 8.3 滴定 锥形瓶中吸收液用盐酸标准溶液（5.5）滴定至溶液呈蓝紫色为终点。同时作试剂空白试验。 8.4 计算 X= (V1 - V 0 ) ´ C ´ 14 ´ 100 ...............................(1) m ´ 5 / 100 式中： X——样品中挥发性盐基氮的含量，单位为毫克每百克（mg/100g）； V1——试样滴定所需盐酸标准溶液的体积，单位为毫升（mL）； V0——空白滴定所需盐酸标准溶液的体积，单位为毫升（mL）； C——盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； 14——与1.00 mL 盐酸标准溶液相当的氮的质量，单位为毫克（mg）； m——试样重，单位为克（g）。 计算结果保留3位有效数字。 9 精密度 在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 A _________________________________ 3