ICS 65.620 B 62 DB41 河 南 省 地 方 标 准 DB 41/T 1078—2015 玉簪育苗技术规程 Technical regulation for Hosta plantaginea production 2015 - 08 - 13 发布 河南省质量技术监督局 2015 - 11 - 13 实施 发 布 DB41/T 1078—2015 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由河南省林业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：安阳市园林绿化科研所、河南农业大学 本标准主要起草人：田世锋、崔茁壮、王永周、李永、马启福、段文彬、武云飞。 本标准参加起草人：郭文霞、李伦、陈改玲、卞瑞卿、陈琳、杨万祥、冯爱霞、郑娜。 I DB41/T 1078—2015 玉簪育苗技术规程 1 范围 本标准规定了玉簪的术语和定义、组培育苗、分株育苗、栽培管理、主要病虫害防治和出圃。 本标准适用于玉簪的育苗。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4285 农药安全使用标准 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 GB/T 15063 复混肥料（复合肥料） NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 玉簪 玉簪(Hosta plantaginea Aschers)百合科玉簪属多年生宿根草本植物，原产中国，喜阴，品种丰 富，是花叶俱佳的观赏花卉。 3.2 组织培养 组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌 操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其它产品的技术。 3.3 MS 培养基 MS 培养基是 Murashige 和 Skoog 于 1962 年为烟草细胞培养设计的，能满足植物细胞的营养和生理 需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 4 组培育苗 4.1 设施设备 组培场地分准备室、洗涤室、培养基配制室、灭菌室、接种室和培养室等。 组培所需仪器设备包括灭菌设备、培养设备和培养容器、实验设备等。 1 DB41/T 1078—2015 4.2 培养基配制 4.2.1 母液配制 MS培养基母液配制见附录A。培养基中添加的植物生长调节物质的配制见附录B。 4.2.2 培养基制作和灭菌 按NY/T 2306的规定执行。 4.3 外植体采集 玉簪组培外植体可选用茎尖和花蕾，在资源上茎尖不及花蕾丰富，在外植体灭菌和污染率方面茎尖 不及花蕾，本标准中玉簪组培选用花蕾作为外植体。 在 6～9 月玉簪开花期间，选择无病虫害健康母株，苞片微张可看到花蕾但还未透色的花蕾作为外 植体。 4.4 外植体清洗消毒 按以下步骤进行： a) 将采集来的花序去杂质：用剪刀剪掉基部多余的花茎和已经透色的花蕾，留下所需要的部分； b) 将处理过的外植体花序放入广口瓶中，用洗洁剂清洗干净，再用自来水将洗洁剂洗净； c) 再用纱布把广口瓶封口，放到自来水下冲洗 30min； d) 将广口瓶内的花序放到无菌操作台上进行消毒：无菌水清洗 5～8 遍→75%酒精清洗 15s→无菌 水清洗 5 遍→9%次氯酸钠清洗 2.5min→无菌水清洗 6 遍→放入培养皿中。 4.5 初代培养 在无菌操作台上将消毒后的花序放在培养皿中的滤纸上，用镊子剥离苞片，用刀片切割花蕾，取花 蕾时，用刀片从花柄上方沿花茎上下纵切，长度约 1cm，刀口深度 1.5mm～2mm。把切割后的花蕾接种到 装有初代培养基的瓶里，每瓶（250mL）接种 1～3 个花蕾，用透气的瓶盖封口。 置于 26℃～28℃的培养室内进行培养，光照强度为 2000lux，光照时间为每天 12h。约一个月后诱 导出的愈伤组织长出长 0.5cm 的芽时进行继代培养。 初代培养基配方：MS+0.2mg/L 6-BA+0.02mg/L NAA +蔗糖 30 g/L+琼脂 5 g/L （根据具体品种可对 激素进行调节） 。 4.6 继代培养 在无菌操作台上将初代培养所获得的分生芽放入培养皿内滤纸上进行分割，分割时每个芽要带有愈 伤组织，并将黄叶和原有的培养基去净，然后将其接种到继代培养基上，每瓶（250mL）接种 6～8 个芽， 然后放置到培养室内（培养室环境同初代培养），约一个月后分生芽长到 2cm～3cm 时进行生根培养。 继代培养基配方：MS+0.2mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+蔗糖 30 g/L+琼脂 5 g/L （根据具体品种可对 激素进行调节） 。 4.7 生根培养： 在无菌操作台上将继代培养的分生芽放入培养皿内滤纸上进行分割（分割方法同继代培养），然后 将分生后的分生芽接种到生根培养基上进行培养，每瓶（250mL）接种 6～8 个芽，然后放置到培养室内 （培养室环境同初代培养） ，约一个月后当新根长到 1cm～2cm，此时进行出瓶。一般为 1 月～3 月或 6 月～7 月。 2 DB41/T 1078—2015 生根培养基配方：1/2MS+0.02mg/L 6-BA （根据具体品种可对激素进行调节） 。 4.8 炼苗 当室内外温度一致时，可直接将生根瓶苗栽植到遮阴度在 50%～70%环境下的基质上；当室内外温 度相差 8℃～10℃，先将 生根瓶苗移出培养室至荫棚进行种植前炼苗，炼苗 2d～3d，然后打开透气瓶盖， 给瓶中加入少量水，7d 后洗净培养基栽入穴盘。一般在 4 月～5 月和 9 月～10 月。 4.9 组培苗移植 4.9.1 穴盘选择 宜采用 105 穴的穴盘。 4.9.2 培养基质配制 培养基质采用泥炭土和珍珠岩（或蛭石）按 4:1 比例配制。 4.9.3 培养基质消毒 4.9.3.1 多菌灵消毒 用 50％多菌灵 800～1000 倍的水溶液充分拌匀基质，然后覆盖膜密封 2d～3d。 4.9.3.2 高锰酸钾消毒 如果土壤比较干，先用清水将表土浇湿(土壤较湿，省略这一步骤)，然后将 稀释成400～600倍高锰 酸钾，用喷雾器均匀喷于表土，后用塑料薄膜覆盖密封曝晒一周左右，即可揭膜使用。 4.9.4 基质装盘 按以下步骤进行： a) 预先湿润基质，湿度 50%～70%； b) 均匀填满各穴孔，轻压基质，使其表面低于穴盘边缘 2mm～3mm； c) 浇透水，待基质内水渗下时种植。 4.9.5 种植 种植时间：以 4～5 月或 9～10 月为宜。 将经过炼苗的生根瓶苗从组培瓶中取出，清洗干净根部培养基后种植在穴盘内，种植深度以培养土 略没过根茎处为宜，轻轻压实。整齐摆放在一般的日光大棚内，保持湿润，遮荫度 50%～70%。 4.9.6 穴盘苗管理 小水喷透移植的组培小苗，之后，保持基质和空气湿润。注意遮荫，遮荫度 50%～70%为宜。一周 后可喷施 0.3%～0.5%的氮、磷、钾复合肥，5d～7d 一次。7d～10d 喷施一次多菌灵，浓度 800～1000 倍，预防病害发生。 5 分株育苗 5.1 分株时间 3 DB41/T 1078—2015 春秋均可。春季：通常为 4 月～5 月，芽长 5cm 以上的时候进行。秋季：分株时间为 9 月下旬～10 月下旬。 5.2 分株方法 每 3～5 年分株一次，当母株达到 10 个芽以上时，将母株从栽种地起出，抖落根部泥土，将植株地 上部分的枯枝败叶清理干净，从根状茎处分割，根据植株的生长势将母株分成带有 2～3 芽的小植株。 分株后用 50%多菌灵 300 倍液蘸一下，然后进行栽植。秋季适当摘除一些老叶。 6 栽培管理 6.1 栽植环境 疏林下或遮阴度 50%～70%的荫棚下。 选择地势平坦、交通方便，水源、电源具备，土层厚度不小于30cm，肥沃、湿润的沙壤土或壤土。 6.2 整地 结合整地，每 667 ㎡施充分腐熟的有机肥 3000kg～5000kg、磷酸二胺 50kg。深翻耙平，清除草根、 石块等杂物，地平土碎，做成 2m 宽平畦，长度视苗圃地而定。 6.3 定植 根据品种冠幅大小，株距 20cm～30cm，行距 30cm～50cm。裸根苗挖穴 20cm 深，穴盘苗挖穴 10cm 深，放入种苗后从四周回填土，轻提种苗，使土面和原根茎土痕持平或略高，周围压实，栽后浇透水。 6.4 水肥管理 定植后 3d～5d 浇第二次水，以后根据天气、土壤墒情合理浇水。雨季注意排水，入冬前浇灌封冻水， 第二年早春浇返青水。 生长季结合浇水每 667 ㎡追施复合肥 20kg～25kg,每年 2～3 次，前期以氮肥为主，后期以磷钾肥为 主。应符合 GB/T 15063 和 NY/T 496 的要求。 定植后适时中耕除草，深度 3cm～5cm，保持土壤疏松。 6.5 修剪 花后及时剪去残花。初冬地上部分枯萎，进入冬季休眠后，将地上部分枯叶剪掉。 7 主要病虫害防治 玉簪主要病害有白绢病、炭疽病和日灼病；主要虫害有蜗牛、蚜虫和蛴螬。 坚持“预防为主、综合防治”的方针，合理使用化学农药，结合实际情况，定期喷药，加强管理， 及时除去病叶、病株并销毁。防治应符合 GB 4285 和 GB/T 8321 的要求。 防治方法参见附录 C。 8 出圃 8.1 地栽苗 4 DB41/T 1078—2015 当芽高 4cm～5cm 后出圃。出圃前 3d～7d 浇水，距离根茎 10cm 外起挖，抖落宿土，查清芽数、摆 放整齐后装箱或装袋，防止暴晒。 8.2 穴盘苗 当芽高 1cm 时出圃，出圃前 1d 浇透水，同时在穴盘短边上贴上标签，穴盘苗包装采用纸箱，用纸 板分隔，种苗朝上，用胶带封口，有向上标志。品种有明显标识。 5 DB41/T 1078—2015 附 录 A （规范性附录） MS 基本培养基母液配制 MS基本培养基母液配制见表A.1。 表A.1 MS基本培养基母液配制 类别 大量元素母液 微量元素母液 铁盐母液 有机物母液 6 配方用量 称取量 配 1L 培养基吸取量 mg/L mg mL NH4NO3 1650 33000 KNO3 1900 38000 KH2PO4 170 3400 MgSO4·7H2O 370 7400 CaCL2·2H2O 440 8800 MnSO4·H2O 22.3 4460 ZnSO4·7H2O 8.6 1720 H3BO3 6.2 1240 KI 0.83 166 Na2MoO4·2H2O 0.25