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SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4057—2014 出口动物源性食品中磺胺类药物 残留量的测定免疫亲和柱净化 HPLC 和 LC-MS/MS 法 Determination of sulfonamides residues in foodstuffs of animal origin for exportHPLC and LC-MS/MS method with immunoaffinity column clean-up 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4057—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国重庆出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:张雷、唐柏彬、郑小玲、存显、曹淑瑞、王国民。 行业标准信息服务平台 SN/T 4057—2014 出口动物源性食品中磺胺类药物 残留量的测定免疫亲和柱净化- HPLC 和 LC-MS/MS 法 1范围 本标准规定了出口动物源性食品中磺胺醋酰、磺胺二甲异嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺 胺甲基嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲唑、磺胺间甲氧嘧 啶、磺胺异嗯唑、磺胺氯吡嗪、磺胺二甲氧嘧啶和磺胺喹嗯琳16种磺胺的免疫亲和柱净化,高效液相色 谱法和液相色谱-串联质谱法检测和确证方法。 本标准适用于猪肉、猪肝、鱼肉、猪脂肪、牛奶、蜂蜜和鸡蛋中磺胺醋酰、磺胺二甲异啶、磺胺嘧啶、 磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺 甲嗯唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺异嗯唑、磺胺氯吡嗪、磺胺二甲氧嘧啶和磺胺喹嗯嘛16种磺胺的免疫亲 和柱净化,高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法检测和确证 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3第一法高效液相色谱法(HPLC法 3.1方法提要 试样中的磺胺类药物经乙醇溶液振荡提取,提取液经过滤、稀释后用磺胺免疫亲和柱净化,高效液 相色谱测定,外标法定量。 3.2 2试剂和材料 服务平台 除特殊注明外,所有试剂均为分析纯,水为符合 GB/T6682规定的 J一级水。 3.2.1甲醇:高效液相色谱级。 3.2.2无水乙醇。 3.2.3冰乙酸。 3.2.4无水磷酸氢二钠。 3.2.5无水磷酸二氢钠 3.2.680%乙醇:量取800mL无水乙醇(3.2.2),用水稀释至1L 二氢钠(3.2.5),加970mL水溶解,加11mL冰乙酸(3.2.3),加水定容至1000mL。 体积比)。 1 SN/T4057—2014 3.2.916种磺胺类化合物标准品:磺胺醋酰(sulfacetamide,SA)、磺胺二甲异嘧啶(sulfisomindine, SIM2)、磺胺嘧啶(sulfadiazine,SDZ)、磺胺噻唑(sulfathiazole,ST)、磺胺吡啶(sulfapyridine,SPD)、磺 胺甲基嘧啶(sulfamerazine,SMR)、磺胺对甲氧嘧啶(sulfamethoxydiazine,SMD)、磺胺甲噻二唑(sulfa methizole,SMTZ)、磺胺二甲嘧啶(sulfamethazine,SM2)、磺胺氯哒嗪(sulfachloropyridazine,SCP)、磺 胺甲嗯唑(sulfamethoxazole,SMZ)、磺胺间甲氧嘧啶(sulfamonomethoxine,SMM)、磺胺异嗯唑(sul- fisoxazole,SIZ)、磺胺氯吡嗪(sulfachloropyrazine,SPZ)、磺胺二甲氧嘧啶(sulfadimethoxine,SMD)和 磺胺嘛(sulfaquinoxaline,SQx),纯度大于或等于95%。16种磺胺类化合物的化学分子式等信息 参见表A.1。 3.2.10磺胺标准储备液:准确称取适量16种磺胺类化合物标准品(3.2.9),用甲醇配制成浓度为 100ug/mL的标准储备液。 3.2.11标准工作溶液:根据需要将标准储备液(3.2.10)用甲醇-0.01mol/L磷酸盐(含1.1%乙酸)溶液 (3.2.8)稀释成5.0ng/mL、10.0ng/mL,20.0ng/mL.50.0ng/mL100.0ng/mL、200.0ng/mL的标准 工作溶液,此溶液现用现配。 3.2.12玻璃纤维滤纸。 3.2.13磺胺类化合物免疫亲和柱:十六合一磺胺化合物免疫亲和柱,最大柱容量不小于200ng。 3.2.14微孔滤膜:0.22μm,有机系。 3.3仪器和设备 3.3.1 高效液相色谱仪配紫外或二极管阵列检测器。 3.3.2 电子天平:感量为0.01g和0.1mg。 3.3.3 组织捣碎机。 3.3.4 旋涡混匀器。 3.3.5 氮吹仪。 3.3.6振荡器。 3.3.7 离心机:转速不低于5000r/min。 3.4 试样的制备与保存 3.4.1 猪肉、猪肝、鱼肉、猪脂肪、鸡蛋 取有代表性样约500g,用组织捣碎机捣碎,装人洁净容器作为试样,密封并做好标识,于一18℃下 保存。 3.4.2牛奶、蜂蜜 取有代表性样约500g,混合均匀,装人洁净容器作为试样,密封并做好标识,于4℃下保存。 3.5提取与净化 3.5.1提取 3.5.1.1猪肉、猪肝、鱼肉、猪脂肪、蜂蜜 准确称5.00g(精确至0.01g)样品于50mL离心管中,加人10mL80%乙醇溶液(3.2.6),涡旋混 合1min,振荡提取30min,5000r/min离心5min,将上清液移至25mL比色管中,残渣用10ml 80%乙醇溶液重复提取1次,合并提取液并用80%乙醇溶液定容至刻度,混匀。准确移取5.00mL提 2
SN-T 4057-2014 出口动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定方法 免疫亲和柱净化 - HPLC和LC-MS-MS法
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